[发明专利]一种基于下一代测序技术检测EGFR/KRAS/BRAF基因突变位点的多重PCR引物和方法及应用在审
申请号: | 201510740906.1 | 申请日: | 2015-11-04 |
公开(公告)号: | CN105331611A | 公开(公告)日: | 2016-02-17 |
发明(设计)人: | 葛良进;邓力蔚;曾立董;刘松;李改玲;林群婷;刘丽春 | 申请(专利权)人: | 深圳市瀚海基因生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫;熊永强 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区西丽街道*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 下一代 技术 检测 egfr kras braf 基因突变 多重 pcr 引物 方法 | ||
1.一种基于下一代测序技术检测EGFR/KRAS/BRAF基因突变位点的多重PCR引物,其特征在于,包括如下a)-f)引物对中的至少两对:
a)用于扩增EGFR基因的外显子18的区域的引物对:SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示引物对和/或SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示引物对;
b)用于扩增EGFR基因的外显子19的区域的引物对:SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示引物对和/或SEQIDNO:7和SEQIDNO:8所示引物对;
c)用于扩增EGFR基因的外显子20的区域的引物对:SEQIDNO:9和SEQIDNO:10所示引物对、SEQIDNO:11和SEQIDNO:12所示引物对和SEQIDNO:13和SEQIDNO:14所示引物对中的一种或多种;
d)用于扩增EGFR基因的外显子21的区域的引物对:SEQIDNO:15和SEQIDNO:16所示引物对、SEQIDNO:17和SEQIDNO:18所示引物对和SEQIDNO:19和SEQIDNO:20所示引物对中的一种或多种;
e)用于扩增KRAS基因的外显子2的区域的引物对:SEQIDNO:21和SEQIDNO:22所示引物对和/或SEQIDNO:23和SEQIDNO:24所示引物对;
f)用于扩增BRAF基因的外显子15的区域的引物对:SEQIDNO:25和SEQIDNO:26所示引物对和/或SEQIDNO:27和SEQIDNO:28所示引物对。
2.如权利要求1所述的基于下一代测序技术检测EGFR/KRAS/BRAF基因突变位点的多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物中,至少包括扩增EGFR、KRAS和BRAF基因中任意两个或三个基因的引物对,其中,每个基因扩增一个或多个外显子的区域,每个外显子区域采用一对或多对引物对。
3.如权利要求1所述的基于下一代测序技术检测EGFR/KRAS/BRAF基因突变位点的多重PCR引物,其特征在于,多重PCR引物为如下引物对中的两对或多对:SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示引物对、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示引物对、SEQIDNO:9和SEQIDNO:10所示引物对、SEQIDNO:13和SEQIDNO:14所示引物对、SEQIDNO:15和SEQIDNO:16所示引物对、SEQIDNO:21和SEQIDNO:22、SEQIDNO:25和SEQIDNO:26所示引物对;和/或
如下引物对中的两对或多对:SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示引物对、SEQIDNO:7和SEQIDNO:8所示引物对、SEQIDNO:11和SEQIDNO:12所示引物对、SEQIDNO:17和SEQIDNO:18所示引物对、SEQIDNO:19和SEQIDNO:20所示引物对、SEQIDNO:23和SEQIDNO:24所示引物对、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28所示引物对。
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