[发明专利]羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体及其制备方法和应用在审
申请号: | 201510744857.9 | 申请日: | 2015-10-31 |
公开(公告)号: | CN105237635A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 张春香;任有蛇;郭丽娜;刘文忠;白元生;师周戈;赵宇琼;焦光月 | 申请(专利权)人: | 山西农业大学 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 030801 山西*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 羊抗兔视黄酸 结合 蛋白 克隆 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体,其特征在于,它的核苷酸序列TGCATGAAGGAGAAGAACCAGGCAGTGAAGGGGGACGCCCCTGGGAAGTTCAAG。
2.羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、将视黄酸结合蛋白5蛋白N端81-98共18个氨基酸作为羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体的抗原表位,合成羊视黄酸结合蛋白5多肽;
S2、取步骤S1所得的1.5mg羊视黄酸结合蛋白5多肽偶联到KLH,脱盐后作为免疫原备用;
S3、采用AbMax标准程序(42天),采用步骤S2所得免疫原对免疫原KLH-CMKEKNQAVKGDAPGKFK多肽免疫兔子进行若干次加强免疫,多肽-BSA的多抗效价达到标准(血清滴度≥1∶50000),第28天每只放血20ml并加强免疫,若动物无异常情况,则在第42天终放血,得羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述抗原表位的氨基酸序列为CMKEKNQAVKGDAPGKFK。
4.如权利要求1所述的羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体的应用,其特征在于,该抗体可以用于山羊和绵羊的免疫组织化学、免疫荧光化学和WesternBlotting检测。
5.如权利要求4所述的羊抗兔视黄酸结合蛋白5多克隆抗体的应用,其特征在于,用于免疫组织化学时浓度为1∶50-200;用于细胞免疫荧光化学时,浓度为1∶50-200;用于Westernblotting时,浓度为1∶500-1000。
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