[发明专利]一种替代抗生素饲料添加剂的地衣芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一株地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02，于2015年4月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.10682。

2.如权利要求1所述的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02在制备替代畜牧业饲料抗生素添加剂中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述替代畜牧业抗生素饲料添加剂，地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02含量不少于2.0×10¹⁰ CFU/克。

4.权利要求2中所述替代畜牧业抗生素饲料添加剂的制备方法，步骤如下：

（1）取活化后的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02斜面种子，在无菌条件下接种于摇瓶培养基中，培养得摇瓶种子液；

（2）将步骤（1）制得的摇瓶种子液接种于种子培养基中，在通气搅拌条件下发酵罐培养，制得发酵罐种子液；

（3）将步骤（2）制得的发酵罐种子液接种于发酵培养基进行发酵培养，至芽孢率高于90%；然后将发酵液经70～85℃处理25～40分钟，制得芽孢含量不低于2.0×10¹⁰ CFU/mL的发酵液；

（4）将步骤（3）制得的发酵液经过滤、干燥，制得地衣芽孢杆菌菌粉，加入稀释剂，制得地衣芽孢杆菌芽孢含量不低于2.0×10¹⁰ CFU/克的替代畜牧业抗生素饲料添加剂。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的活化后的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02斜面种子，采用如下方法制备：

将地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02接种于活化培养基中，32～35℃活化培养34～40h，制得活化后的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）SDZD02斜面种子；

所述活化的固体培养基，每升组分如下：

蛋白胨10克，酵母膏5克，氯化钠10克，琼脂粉15克，蒸馏水定容至1L。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中摇瓶培养为：32～35℃、转速180～200 rpm的条件下，摇瓶培养16～24h，摇瓶培养基占摇瓶总体积的65～70%；

所述摇瓶培养基，每升组分如下：

蛋白胨10克，酵母膏5克，氯化钠10克，蒸馏水定容至1L。

7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，发酵罐培养为： 温度32～35℃、通气量为1∶（1.0～1.1）发酵液体积m³/空气体积m³·分钟、压力0.015～0.02MPa、搅拌速度为220～260rpm的条件下，发酵罐培养16～20h；接种量为2～5％（体积百分比），种子培养基占发酵罐体积的65～70%；

所述种子发酵培养基组分如下，均为重量份：

蛋白胨0.1～2份、酵母膏0.1～2份、玉米淀粉0.2～2份、大豆粉0.2～3份、氯化钠0.01～0.2份、硫酸氨0.02～0.1份、硫酸锰0.01～0.5份，水90.2～99.36份。