[发明专利]一种支链脂肪酸微量分离富集方法

权利要求书

1.一种支链脂肪酸微量分离富集方法，其特征在于：原料经过衍生化、尿素溶液包合、尿素硅胶薄层板制备、尿素硅胶薄层展开与提取、硝酸银薄层板制备、硝酸银薄层展开与提取步骤，从天然可食用脂质中富集得到支链脂肪酸，其包括，

将油脂原料衍生化为脂肪酸甲酯：取一定量油脂于试管，加入KOH-NaOH溶液，65℃皂化30min，加入BF₃-CH₃OH，70℃条件下酯化3～5min，加入正己烷后，再加入饱和NaCl后取上层液体，加入无水硫酸钠，离心10000rpm/5min，取上清，氮气吹干得到脂肪酸甲酯；

尿素溶液包合：尿素按照体积比1∶4比例加入到纯甲醇中，于65℃加热，待尿素完全溶解，加入所述脂肪酸甲酯，搅拌溶解完全，继续加热20min后，冷却到室温，放置于低温下保存后，过滤分离尿素包合物，滤液用等体积石油醚萃取2次，每次萃取10min，石油醚层用0.5倍量的5％NaCl溶液洗涤，石油醚层用无水硫酸钠脱水后，真空旋转蒸发溶剂；

尿素硅胶薄层板制备：将硅胶薄层板，浸入尿素甲醇饱和溶液中，取出于通风厨晾干30min，制备得尿素硅胶薄层板，立即使用；

尿素硅胶薄层展开与提取：取所述尿素溶液包合中分离得到的脂肪酸甲酯在尿素硅胶薄层板上展开，点样后待出现白色络合物，覆盖一层尿素甲醇饱和溶液，25℃烘干5min，取出用第一展开剂展开，展开完毕，取出碘显色，待碘挥发后，刮出Rf＝0.63～0.76处甲酯条带，4mL无水乙醚提取，氮气吹干；

硝酸银薄层板制备：在展开装置的一侧倒入乙腈，另一侧倒入20％硝酸银的乙腈溶液，在所述20％硝酸银的乙腈溶液的一侧放入硅胶薄层板，避光展开，展开完毕，取出避光通风橱晾干，制备得硝酸银硅胶薄层板；

硝酸银薄层展开与提取：将尿素硅胶薄层板分离得到的脂肪酸甲酯溶于氯仿在硝酸银硅胶薄层板上用第二展开剂展开，取出碘显色，待碘挥发后，刮出饱和脂肪酸条带，无水乙醚提取三次，氮气吹干，富含支链脂肪酸的脂肪酸产品；

所述第一展开剂为正己烷、无水乙醚和乙酸，且满足体积比正己烷∶无水乙醚∶乙酸＝80∶20∶1；

所述第二展开剂为甲苯和正己烷，且满足体积比甲苯∶正己烷＝40∶60；

所述尿素溶液包合，其中，所述加入所述脂肪酸甲酯，尿素与脂肪酸甲酯体积比例为4∶1，包合温度为4℃，包合时间2h。

2.如权利要求1所述的支链脂肪酸微量分离富集方法，其特征在于：所述尿素硅胶薄层板制备中，尿素硅胶薄层板的浸泡时间为1min，浸泡高度为8cm。

3.如权利要求1所述的支链脂肪酸微量分离富集方法，其特征在于：所述硝酸银薄层展开与提取中，饱和脂肪酸条带的相对位移为Rf＝0.714～0.857。