[发明专利]诱导辣椒素受体Y739位点的特异性抗体的多肽

说明书

本发明公开了一种诱导辣椒素受体Y739位点的特异性抗体的多肽；在制备治疗与鳞状细胞皮肤癌的转化有关的疾病的药物组合物过程中，采用所述多肽获得辣椒素受体Y739位点的特异性抗体，并且所述特异性抗体包含在所述药物组合物中。

技术领域

本发明涉及抗体生产领域，具体地，涉及一种特异性诱导辣椒素受体Y739位点的抗体的多肽。

背景技术

瞬时感受器电位香草酸受体(transient receptor potential vaniloid 1,VR1),又称为辣椒素受体，属于瞬态电压感受器阳离子通道(transient receptorpotential cation channel)，广泛分布于伤害性感受器上产生疼痛或痛过敏。近期的研究表明，VR1与肿瘤的发生发展关系密切。VR1在多种肿瘤细胞中表达异常。但VR1影响肿瘤的发生发展的机制尚不清楚。对VR1的进一步研究有助于了解和阐明其参与调节肿瘤发生发展的分子机制。

已有研究表明VR1具有多个磷酸化位点，VR1活化可由自身不同氨基酸位点的磷酸化所调节，这些磷酸化过程涉及PKA，PKC及钙调蛋白激酶CaMKII等通路。一项新的研究表明VR1的羧基端Y739位点可被磷酸化，并与鳞状细胞皮肤癌的转化有关。该磷酸化位点位于与激酶A锚定蛋白AKAP的相互作用的重要区域内，多个VR1被磷酸化调节位点也位于该区域，与VR1的辣椒素及热敏活性相关。该位点的磷酸化极有可能参与调解VR1对辣椒素、PH、热刺激等的敏感程度。而要研究VR1的Y739位点的生物学功能，尤其是其被磷酸化后功能的改变，该位点特异的磷酸化抗体将是一个必不可少的工具。然而，目前市场上却并没有VR1Y739位点特异性的磷酸化抗体，这严重阻碍了该蛋白功能的进一步研究和其与肿瘤发生发展相互关系和机制的阐明。

发明内容

本发明的一个目的填补市场上没有VR1Y739位点特异性的磷酸化抗体的空白。本发明通过提供一种诱导辣椒素受体Y739位点的特异性抗体的多肽来实现，该多肽的特征在于，其序列为NH₂-CGYTPDGKDDYR-CONH₂，或NH₂-CGYTPDGKDDp[Ser]R-CONH₂。

在本发明的一些实施例中，所述多肽与钥孔血蓝蛋白相偶联。

在本发明的一些实施例中，采用序列为NH₂-CGYTPDGKDDYR-CONH₂的多肽进行免疫，可以获得辣椒素受体Y739位点的抗总肽段抗体。

在本发明的另外一些实施例中，采用序列为NH₂-CGYTPDGKDDp[Ser]R-CONH₂的多肽进行免疫，获得辣椒素受体Y739位点的特异性磷酸化抗体。

本发明的另一方面是提供一种辣椒素受体Y739位点的特异性抗体，其特征在于，所述特异性抗体能特异性地结合权利要求1中序列为NH₂-CGYTPDGKDDYR-CONH₂的多肽和序列为NH₂-CGYTPDGKDDp[Ser]R-CONH₂的多肽中的一个或两个。

本发明的另一方面包括编码所述多肽的核酸，以及所述特异性抗体的核酸。

本发明还提供了制备辣椒素受体Y739位点的特异性抗体的方法，其特征在于包括以下步骤：

A)采用权利要求1所述的多肽作为抗原免疫动物；

B)收集步骤A)中动物的血清，两步特异性多肽亲和法纯化得到所述特异性抗体。

本发明进一步还提供了一种药物组合物，其用于治疗与鳞状细胞皮肤癌的转化有关的疾病，其特征在于，所述药物组合物制备过程中采用所述多肽获得辣椒素受体Y739位点的特异性抗体，并且所述特异性抗体包含在所述药物组合物中。