[发明专利]用于控制蜂中的瓦螨的组合物

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2010年10月14日，申请号为201080056585.9(PCT/IL2010/000844)，发明名称为“用于控制蜂中的瓦螨的组合物”。

发明领域和背景

本发明涉及用于控制蜂中的瓦螨(Varroamite)侵染的组合物。

蜜蜂，即意大利蜜蜂(Apismellifera)为农作物的有效授粉所必需，因此对世界农业而言为关键性的。蜜蜂亦产生经济上重要的产物，包括蜂蜜和蜂蜡。蜜蜂易感染许多寄生虫和病原体，包括外寄生螨、狄斯瓦螨(Varroadestructor)。

蜜蜂的蜂群崩溃失调病(ColonyCollapseDisorder，CCD)对摧毁美国和世界农业造成威胁。实际上，2006-2007年冬天在美国最近爆发的CCD中，估计240万蜜蜂蜂巢的25%或更多因为CCD而消失。估计23%的美国养蜂运作在2006-2007年冬天受CCD所累，影响了平均45%的养蜂人运作。在2007-2008年冬天，USDA-ARS的CCD行动小组估计，总计来自商业运作的全部蜂巢的36%被CCD破坏。

CCD通过自一群其成年蜂群体的迅速消失来表征，通常在距蜂群一定距离处发现死亡的成年蜂。在崩溃末期，蜂王仅由少量新形成的成年蜂照料。崩溃的蜂群常常具有大量封盖的幼蜂和食物储备。CCD现象首先在2006年报道；然而，养蜂人早在2004年就注意到与CCD一致的独特的蜂群衰退。已假定多种因素作为原因，所述因素为例如螨和传染剂、天气模式、电磁(蜂窝天线)辐射、杀虫剂、营养不良和应激。迄今为止，CCD的控制已集中在瓦螨控制、环境卫生和移除受影响的蜂巢，针对机会性感染(例如小孢子虫(Nosema))进行处理和改善营养。至今仍未开发有效的预防措施。

瓦螨寄生于蛹和成年蜂中并且在蛹的抚幼室中繁殖。螨使用它们的嘴刺穿外骨骼并且以蜂的血淋巴为食。这些外骨骼中的伤口部位隐匿细菌感染，例如蜂房球菌(Melissococcuspluton)，其导致欧洲幼虫腐臭病(Europeanfoulbrood)。此外，因为它们的寄生作用，怀疑瓦螨充当许多蜜蜂病原体的载体，所述病原体包括羽翼畸形病毒(DWV)、克什米尔蜜蜂病毒(KBV)、蜜蜂急性麻痹病毒(ABPV)和黑蜂王台病毒(BQCV)，并且瓦螨可减弱其宿主的免疫系统，使得它们易受感染的攻击。如果不加以治疗，瓦螨侵染典型地导致群体水平的死亡率。

治疗瓦螨侵染的现行方法被证明无效，因为螨形成对现有杀螨剂的抗性。此外，使用这类杀螨剂可能将有害的化学品引入旨在用于人消费的蜂蜜中。

美国专利申请20090118214教导了dsRNA用于预防和治疗蜜蜂中的病毒感染中的用途。

发明概述

本发明某些实施方案的一个方面提供了一种分离的核酸剂，所述核酸剂包含减量调节狄斯瓦螨基因产物的表达的核酸序列。

本发明某些实施方案的一个方面提供了一种核酸构建体，所述核酸构建体包含编码本发明的分离的核酸剂的核酸序列。

本发明某些实施方案的一个方面提供了一种蜂可摄取的组合物，所述组合物包含至少一种核酸剂，所述核酸剂包含减量调节狄斯瓦螨基因产物的表达的核酸序列。

本发明某些实施方案的一个方面提供了预防或治疗蜂巢的狄斯瓦螨侵染的方法，所述方法包括给蜂施用有效量的至少一种包含减量调节狄斯瓦螨基因产物的表达的核酸序列的核酸剂，从而预防或治疗蜂巢的狄斯瓦螨侵染。

本发明某些实施方案的一个方面提供了预防或治疗蜂巢的狄斯瓦螨侵染的方法，所述方法包括给蜂施用有效量的本发明的核酸构建体，从而预防或治疗蜂巢的狄斯瓦螨侵染。

本发明某些实施方案的一个方面提供了降低蜜蜂对蜂群崩溃失调病(CCD)的易感性的方法，所述方法包括给蜜蜂施用有效量的至少一种双链核糖核酸(dsRNA)，所述至少一种dsRNA包含与狄斯瓦螨mRNA的至少21个核苷酸互补且能够诱导狄斯瓦螨特异性mRNA降解的序列。

根据本发明的某些实施方案，所述核酸序列与狄斯瓦螨特异性RNA的至少21个核苷酸互补且能够诱导狄斯瓦螨RNA降解。