[发明专利]一种乌药叶提取物的制备方法及其用途在审
申请号: | 201510754880.6 | 申请日: | 2015-11-05 |
公开(公告)号: | CN105193935A | 公开(公告)日: | 2015-12-30 |
发明(设计)人: | 张琳;田景奎;徐婵娟;韩昊特;周大庆 | 申请(专利权)人: | 常熟求是科技有限公司 |
主分类号: | A61K36/54 | 分类号: | A61K36/54;A23L1/29;A61P39/06;A61K127/00 |
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地址: | 215500 江苏省常熟市经济技术*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乌药 提取物 制备 方法 及其 用途 | ||
技术领域
本发明涉及一种乌药叶提取物,本发明同时涉及该提取物的制备方法及其在抗氧化功效方面的应用,属保健食品与生物医药领域。
技术背景
乌药是樟科山胡椒属植物,以块根入药,具有行气止痛,温肾散寒的功效,用于治疗寒凝气滞,胸腹胀痛,气逆喘急,膀胱虚冷,遗尿尿频,疝气疼痛,经寒腹痛等症。乌药以浙江省天台县所产为道地药材,又称天台乌药、台乌药。此外,乌药嫩叶也可作为茶饮,具有防治心脑血管疾病的效果,近年来已批准作为新资源食品、新食品原料使用。
乌药叶主要含有黄酮类、倍半萜内酯类、单糖苷类、挥发油类等成分。发明人对乌药叶进行了长期研发,从乌药叶中分离鉴定了多种化学成分(罗镭等,乌药叶化学成分的研究,中草药,2009,40:856-858),并发现乌药叶总黄酮具有抗氧化、扩张血管、降低血清胆固醇、增加冠脉流量、抗心率失常等多种作用(张琳等,治疗心脑血管疾病的中药提取物的制备方法及其用途,专利号ZL200710070623.6),但其药效物质有待阐释。在近期研究中,进一步发现乌药叶精制总黄酮是其主要有效物质,作为一种新资源食品提取物具有开发利用潜力,因而对其提取物的制备工艺进行深入研究,从而完成了本发明。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺和质量可控的乌药叶提取物。
本发明提供的乌药叶提取物制备方法包括以下工艺步骤:
(1)选取乌药叶药材,采用水或乙醇-水混合溶媒进行提取,浓缩,浓缩液采用大孔树脂吸附,先用水或10-20%乙醇洗脱,再用40-75%乙醇洗脱,收集40-75%乙醇洗脱液,浓缩,干燥,得中间体;
(2)取由(1)所得中间体,用pH6-7溶液溶解,上聚酰胺树脂柱进行吸附,先用水或10-20%乙醇洗脱,再用40-80%乙醇洗脱,收集40-80%乙醇洗脱液,浓缩,干燥,即得。
所述工艺步骤(1)可参考徐婵娟(乌药叶乙醇提取物体外抗氧化及槲皮苷纯化工艺的研究,浙江大学硕士学位论文,2015)等已公开文献方法进行。所述提取溶媒可采用常规的水或乙醇-水混合溶媒提取,其中优选50-70%乙醇混合溶媒提取。所述吸附剂优选非极性或弱极性大孔树脂,洗脱时先用水洗或10-20%乙醇洗脱除去杂质后,再用40-75%乙醇洗脱,其中优选采用60-80%乙醇进行洗脱。
所述工艺步骤(2)中,所述吸附剂选用聚酰胺,洗脱时先用水或10-20%乙醇洗脱除去杂质后,再用40-80%乙醇洗脱,其中优选采用50-70%乙醇进行洗脱。所述乌药叶提取物中,主要含有槲皮苷(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-(1-2)-α-L-鼠李糖苷(2)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(3)等黄酮类成分,其中槲皮苷的含量大于50%,化合物2、3的含量均大于5%。
本发明同时对所述乌药叶提取物(WYE)的体内外抗氧化作用进行了考察。实验结果证明,WYE(125-500μM)可以显著保护人脐静脉内皮细胞株免受过氧化氢诱导的氧化应激损伤;WYE注射给药(4-16mg/kg)对老龄大鼠具有显著体内抗氧化作用;WYE起效的主要机制在于增加抗氧化酶SOD和GSH的含量。结果表明所述乌药叶提取物具有优良的抗氧化作用,因而可以应用于具有抗氧化功能的相关药物或保健食品中。
本发明内容通过大量实验研究和工艺优化分析完成,并对提取物中主要活性成分进行了定量分析。所述乌药叶提取物具有有效成分含量高、制备工艺容易产业化、产品质量可控等显著优势。以下述具体实施例进行说明。
附图说明
附图为实施例1中乌药叶提取物的液相色谱图。图中,色谱峰1-3依次为槲皮苷(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-(1-2)-α-L-鼠李糖苷(2)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(3)。
具体实施方式
本发明所述的乌药叶提取物是按以下实施例所表示的方法制造,所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义上的对本领域发明权利要求的限制。
实施例1:乌药叶提取物的制备
乌药叶于2012年采自浙江天台山(批次CC20120801),经鉴定为乌药(CynanchumchinenseR.Br.)干燥叶。乌药叶提取物的制备:
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