[发明专利]丹参酮生物合成抑制因子基因SmJAZ3及其编码蛋白与用途

权利要求书

1.一种丹参酮生物合成抑制因子基因SmJAZ3，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其获得方法为：

1、组织分离

取丹参植株幼嫩组织保存于-80℃冰箱，

2、RNA的分离

取部分组织用研钵研碎，加入裂解液匀浆后移至1.5mL EP管中，抽提总RNA，普通琼脂糖凝胶电泳鉴定总RNA质量，然后在NanoDrop上测定RNA含量，

3、克隆基因全长

利用甲基茉莉酸诱导摇瓶中培养两个月的丹参毛状根，抽提RNA，将其反转录成cDNA，利用高通量测序进行转录组分析，

3.1、转录组测序

通过对丹参发根材料进行转录组测序，采用本地Blast策略筛选得到一条与拟南芥JAZ3高度同源的序列，该条序列5'端完整，但3'端不完整，

3.2、5'端序列克隆

根据测序的序列设计上下游引物F1、R1，通过PCR得到5'端完整序列，胶回收，回收产物连接到18T载体，利用通用引物M13进行测序，得到SmJAZ3基因5'端的物理序列，

3.3、3'端序列克隆

根据5'端完整的基因序列，设计正向特异引物F2，经过PCR，扩增得到3'端序列，回收，将其连接18T载体，利用通用引物M13进行测序，得到SmJAZ3基因3'端的物理序列，

3.4、将测序结果比对并进行拼接，得到全长片段序列信息，并设计一对特异引物进行PCR扩增得到SmJAZ3编码区。

2.根据权利要求1所述的丹参酮生物合成抑制因子基因SmJAZ3，其特征在于，所述基因SmJAZ3编码的蛋白质的氨基酸残基序列如SEQ ID No.2所示。

3.一种质粒，其特征在于，所述质粒含有基因SmJAZ3的全序列，基因SmJAZ3核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

4.一种植物过表达载体，其特征在于，所述植物表达载体含有基因SmJAZ3的正向全序列，基因SmJAZ3正向全序列如SEQ ID No.1所示。

5.一种植物反义抑制载体，其特征在于，所述植物反义抑制载体含有基因SmJAZ3的反向全序列，基因SmJAZ3正向全序列如SEQ ID No.1所示。