[发明专利]从柿子中提取单宁的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种从柿子中提取单宁的方法。

背景技术

柿子(PersimmonDiospryroskakiL)果肉中含量丰富的单宁类物质。研究表明，柿子单宁具有很强的抗氧化性以及和蛋白质结合能力，具有抑制人淋巴细胞白血病、降血压、清除体内自由基以及明显抑制蝮蛇、眼镜蛇、五步蛇毒液中多种酶类以及毒素的活性。虽然也有报道称柿子提取物，有效成分为黄酮、三萜类和可水解单宁，对枯草芽孢杆菌表现出了一定的耐药性，但耐药性并不稳定。目前并未见到柿子单宁可用于抑制变形链球菌的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从柿子中提取单宁的方法，提取的柿子单宁可有效抑制变形链球菌，具有很好的防龋齿效果。

本发明提供的技术方案是从柿子中提取单宁的方法，包括以下步骤：

1)将柿子去皮，破碎，加入乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；

2)将滤液浓缩，加入95v％乙醇，放置过夜，离心，取上清液；

3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；

4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，过滤，取滤液通过截留分子量为400～500的中空纤维膜，收集截留液备用；

5)将截留液通过截留分子量为13000～15000的中空纤维膜，收集透过液，干燥，即为柿子单宁粉末。

步骤1)中，乙醇的体积浓度为70～80％，其加入量为柿子重量的10～20倍，在60～80℃下提取1～3次，每次1～3h。

步骤2)中，乙醇的加入量为浓缩液的2～4倍。

步骤3)中，水的加入量为浸膏重量的3～5倍。

本发明提取得到的柿子单宁具有很好的抑制变形链球菌的效果，可用于防龋齿。

具体实施方式

以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。

实施例1

1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的10倍的70v％乙醇，在60℃下提取1h，合并提取液，过滤，取滤液备用；

2)将滤液浓缩，加入95v％乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的2倍,放置过夜，离心，取上清液；

3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；

4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，水的加入量为浸膏重量的3倍,过滤，取滤液通过截留分子量为400～500的中空纤维膜，收集截留液备用；

5)将截留液通过截留分子量为13000～15000的中空纤维膜，收集透过液，真空冷冻干燥，即为柿子单宁粉末。

实施例2

1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的20倍的80v％乙醇，在80℃下提取3次，每次3h，合并提取液，过滤，取滤液备用；

2)将滤液浓缩，加入95v％乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的4倍,放置过夜，离心，取上清液；

3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；

4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，水的加入量为浸膏重量的5倍,过滤，取滤液通过截留分子量为400～500的中空纤维膜，收集截留液备用；

5)将截留液通过截留分子量为13000～15000的中空纤维膜，收集透过液，真空冷冻干燥，即为柿子单宁粉末。

实施例3

1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的15倍的75v％乙醇，在70℃下提取2次，每次2h，合并提取液，过滤，取滤液备用；

2)将滤液浓缩，加入95v％乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的3倍,放置过夜，离心，取上清液；

3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；

4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，水的加入量为浸膏重量的4倍,过滤，取滤液通过截留分子量为400～500的中空纤维膜，收集截留液备用；

5)将截留液通过截留分子量为13000～15000的中空纤维膜，收集透过液，真空冷冻干燥，即为柿子单宁粉末。

对照实施例1

1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的15倍的75v％乙醇，在70℃下提取2次，每次2h，合并提取液，过滤，取滤液备用；

2)将滤液浓缩，加入95v％乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的3倍,放置过夜，离心，取上清液；