[发明专利]婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的提纯方法

说明书

婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的提纯方法。目前，由于配方乳粉成分比较复杂，既含有蛋白质、脂肪、糖水化合物等常量成分，又含有多种矿物元素和多种维生素，尤其含有较多的乳糖，因此准确检测其中的低聚半乳糖难度较大，准确测定婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的含量仍然是国内外的技术难题。本发明的组成包括：该方法步骤如下：用79±1％的乙醇水溶液提取婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖，通过萃取、膜透析等除去蛋白质、脂肪等干扰物质，然后再通过液相色谱法纯化，分离出去蔗糖、乳糖等难以去除的干扰物，浓缩定容，得到没有蔗糖、乳糖、蛋白质、脂肪等干扰物质的低聚半乳糖提纯溶液。本发明用于婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的提纯方法。

技术领域：

本发明涉及一种婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的提纯方法。

背景技术：

低聚半乳糖是我国卫生部允许使用的食品添加剂，也允许在婴幼儿配方乳粉中添加。我国允许添加的低聚半乳糖是指以牛乳中的乳糖为原料，经β-半乳糖苷酶的催化水解半乳糖苷键，生成半乳糖和葡萄糖，并通过转半乳糖苷的作用，将水解下来的半乳糖苷转移到乳糖分子，生成低聚半乳糖。低聚半乳糖是由2个~8个单糖通过β-糖苷键连接形成直链寡糖,不能被人体上消化道消化吸收,可以直接进入大肠。低聚半乳糖分子式如下：

CH2OH-C5H5(OH)3O-（C6H11O5)n-O-C5H5(OH)3O-CH2OH，其中（C6H11O5)n，其中字母n是半乳糖聚合数，n为1-7。

国内外科学家的大量研究表明,低聚半乳糖具有低能量、促进肠道双歧杆菌的增殖、改善矿物质元素的吸收、防止骨质减少、改善脂质代谢、预防和治疗便秘、低致龋齿性、生成营养物质、改善营养状况、提高免疫力、增强抗肿瘤和抗衰老等多种生理功能。近年来，婴幼儿配方乳粉生产企业添加低聚半乳糖的产品越来越多，但婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的定量分析技术还不成熟。目前，由于配方乳粉成分比较复杂，既含有蛋白质、脂肪、糖水化合物等常量成分，又含有多种矿物元素和多种维生素，尤其含有较多的乳糖，因此准确检测其中的低聚半乳糖难度较大，准确测定婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的含量仍然是国内外的技术难题，其中的关键是原来没有能够较好地去除配方乳粉中各种干扰物的好方法。

发明内容：

本发明的目的是提供一种婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的提纯方法。

上述的目的通过以下的技术方案实现：

一种婴幼儿配方乳粉中低聚半乳糖的提纯方法，该方法步骤如下：

用79±1％的乙醇水溶液提取婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖，通过萃取、膜透析等除去蛋白质、脂肪等干扰物质，然后再通过液相色谱法纯化，分离除去蔗糖、乳糖等难以去除的干扰物，浓缩定容，得到没有蔗糖、乳糖、蛋白质、脂肪等干扰物质的低聚半乳糖提纯溶液；

步骤一：提取低聚半乳糖：

将添加了低聚半乳糖的婴幼儿配方乳粉样品5.00g～10.00g放入100mL烧杯中，用21mL温水（约45℃）使样品充分溶解，形成样品溶液，样品溶液转入100mL容量瓶中，然后每次用约10mL无水乙醇冲洗烧杯，连续冲洗3次，冲洗液依次转入100mL容量瓶中，与样品溶液合并，待样品溶液温度降至室温后，用室温的无水乙醇定容至100mL，充分混匀，超声波震荡提取10min，室温放置过夜，取150mL三角烧瓶与玻璃三角漏斗，放好定性滤纸，把样品溶液过滤,得到样品提取初步滤液，移取样品初步滤液20mL，转入MD34（7000）透析袋，透析袋置于已有20mL水的玻璃容器中，水的液 面高于透析袋的液 面，透析15小时后取出，此时大部分小分子蛋白类干扰物质已经留在透析袋内，取透析袋外的溶液用0.45微米有机微孔滤膜过滤，得到样品提取滤液；

步骤二：纯化低聚半乳糖：