[发明专利]一种简易的制备粒径均匀PLGA微球的方法

说明书

技术领域

本发明涉及聚合物微球的制备工艺，特别涉及粒径分布均匀的PLGA微球，属于生物医用材料技术领域。

背景技术

聚乳酸羟基乳酸(PLGA)是一种生物可降解的高分子材料，在体内可最终降解生成二氧化碳和水，安全无毒且生物相容性好，被视为优良的医用材料，并已被美国食品和药品管理局(FDA)批准用于临床。以PLGA材料制备的微球载体在生物医药领域具有重要用途，受到广泛研究，包括药物递送、抗体制备、疫苗佐剂等。目前，FDA已经批准了多种基于PLGA微球的药物制剂进入临床，如LupronDeport等。2009年，我国SFDA也批准了2种可注射性的微球药物制剂上市。

PLGA微球的粒径是决定PLGA微球性能的关键因素之一，粒径不同，其用途与生物学效应差异显著。粒径大小与均匀性的控制直接影响到PLGA微球应用的有效性与可重复性。基于此，如何改进制备工艺，以制备大小可控、粒径均匀的PLGA微球一直以来是本领域研究的重点之一。目前，关于PLGA微球的制备方法主要包括：1)搅拌乳化法；2)超声乳化法；3)喷雾干燥法；4)膜乳化法。搅拌乳化法较为低廉简便，其通过搅拌速度与时间控制粒径大小，但由于乳化过程中液体受力很不均匀，形成的颗粒大小很不均匀。尽管通过差速离心可以使大小相当的微球得到一定程度的富集，但由于微球粒径分布较宽，富集获得的微球产率很低(＜30％)。此外，利用该方法制备小尺寸微球需要极高的转速，如获得1-2μm微球需要近万转/分的搅拌速度，需要较为专业的设备；超声乳化法一般用于制备纳米级微球，不适合微米级微球的制备；喷雾干燥法不仅需要特殊装置，且制备颗粒大小的均匀性差；膜乳化法获得PLGA颗粒均匀性较好，但所用的专业设备与耗材成本较高。由于现有方法的上述局限性，使得许多研究制备的PLGA微球的质量与均一性不佳，结果重复性差；而均一性较好的PLGA微球只能在较为专业的实验室完成。因此，发展一种颗粒均匀性好、简便、可推广性强的PLGA微球制备方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种改进的搅拌乳化法，利用常规的搅拌器即能够以较高的产率制备出较小尺寸、粒径均匀的PLGA微球载体，用于药物递送领域。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种制备粒径均匀的PLGA微球方法，包括以下步骤：

(1)将PLGA溶解到二氯甲烷有机溶剂中，得到油相，PLGA浓度6-20％；

(2)将上述油相分散到聚乙烯醇水相中，向其中加入2-8mm直径的珠子，搅拌乳化，聚乙烯醇1-4％，，油相与水相比例1∶10-1∶5；

(3)取出珠子，使二氯甲烷有机溶剂充分挥发；

(4)离心收集PLGA微球，并使用蒸馏水洗涤；

(5)用蒸馏水重悬PLGA微球，差速离心10分钟以上，获得PLGA微球。

在一个实施方案中，PLGA材料分子量可为10-100kDa不等，LA/GA可为75∶25，50∶50，25∶75不等；

在另一个实施方案中，珠子直径大小可以是2-8mm，优选4-6mm。另外珠子可以是任何适宜材料的珠子，例如可以是玻璃珠、铜珠、铝珠等。

在另外一个实施方案中，乳化时转速不超过1000rpm。

在又一个实施方案中，在步骤(1)中加入药物以制备载药微球。其中所述药物可以是溶解于二氯甲烷的药物，例如利福平。

本发明的有益效果是在珠子辅助的乳化下，使用常规的低速搅拌器，如磁力搅拌器，即可达到很好的乳化分散效果，结合简单的差速离心方法，可获得粒径均匀的PLGA微球。相对于现有技术而言，本方法设备简单，成本低廉，低速搅拌乳化即可获得直径小至1μm的PLGA微球，所获的微球粒径分布均匀，富集产率高。

附图说明

图1为常规搅拌乳化与玻璃珠辅助搅拌乳化示意图。1a为常规搅拌乳化示意图；1b玻璃珠辅助搅拌乳化示意图；

图2为不同转速下，常规搅拌乳化与玻璃珠辅助搅拌乳化获得的PLGA微球光学照片。其中，图2a为400转/分转速下常规搅拌3小时，2b为800转/分转速下常规搅拌3小时，2c为400转/分转速下常规搅拌3小时，2d为400转/分转速下玻璃珠辅助搅拌3小时，2e为800转/分转速下玻璃珠辅助搅拌3小时，2f为1000转/分转速下玻璃珠辅助搅拌3小时(Bar＝20μm)；