[发明专利]一种检测底泥沉积物中生物硅含量的方法

权利要求书

1.一种检测底泥沉积物中生物硅含量的方法，包括以下步骤：

（1）冷冻—干燥：样品-80℃冷冻48h，干燥后样品含水率保持在1%—5%，样品放置在自封口袋内密封，室温平衡12—24h，过100—150目筛；

（2）称取样品180—200mg放入50mL聚丙烯离心管中；

（3）加入4—5mL9%—11%的H₂O₂于管中，静置30—40min，然后再加4—6mL1.00—1.50mol/LHCL，超声40kHz振荡25—30min；

（4）加18—20mL去离子水，在离心率4200—4500g下离心5—8min后倒掉上清液，沉积物质不可扰动，如果出现沉积物质扰动，重复步骤本步骤2—3次；将含有沉积物质的离心管置于50—60℃烘箱中烘10—12h；

（5）吸取36.0—40.0mL2mol/LNa₂CO₃于步骤（4）烘后的离心管中，超声40kHz振荡后放在80—85℃的水浴锅中恒温加热；

（6）以2—3h为间隔，用塑料棒人工手动搅拌溶液，5—6h后取出管子，并迅速在4200—4500g下离心5—10min；

（7）快速移出4—6mL上清液，并保存在聚丙烯管中以备测定；

（8）经过以上步骤，沉积物中生物硅已经完全溶解，可通过在光学显微镜检查沉积物残渣中已不存在硅藻壳，定性检测完成后采用硅钼蓝比色法进行定量检测。

2.根据权利要求1所述的方法，样品贮存与检测过程中不与玻璃器皿接触；如果用到玻璃器皿，先进行全程序空白试验，用扣除空白的方法消除玻璃器皿的干扰；配制试剂用水为蒸馏水。

3.根据权利要求1所述的方法，所述的底泥为取自重要水源地、河流、湖泊或水库淡水水体中的底泥。

4.根据权利要求1所述的方法，所述的硅钼蓝比色法，包括以下步骤：

（1）利用HCl调节溶液pH值至6.80—7.20，在形成黄色硅钼杂多酸后采用加入1，2，4-氨基萘酚磺酸还原剂时，被还原至硅钼蓝，采用硅钼蓝比色法进行比色测试，从而提高测试灵敏度；

（2）还原剂的配制，溶解500mg1-氨基-2-萘酚-4-磺酸和1gNa₂SO₃于水中，可加温，然后将溶液加入含有30gNaHSO₃的150mL水溶液中，过滤入聚乙烯溶液中，放入冰箱避光保存，如果发现溶液颜色变深停止使用重新配制；

（3）二氧化硅标准溶液，取每毫升含1.00mg二氧化硅的贮备液10.00mL移入1000mL容量瓶中，稀释到标线，用聚乙烯瓶密封保存；此溶液中每毫升含10.0μg二氧化硅；

（4）其他试剂配制，钼酸铵试剂：溶解10g钼酸铵于水中，稀释至100mL，如有不溶物可过滤，用氨水调节至pH7—8；1+1盐酸溶液5mL；草酸溶液，75g/L：溶解7.50g草酸于水中，稀释至100mL；二氧化硅贮备液：称取高纯石英砂0.2500g置于铂坩埚中，加入无水碳酸钠4g，混匀，放入马弗炉在1000℃熔融1h，取出冷却后放入塑料烧杯中用热水浸取，用水洗干净坩埚与盖，移入250mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，贮于聚乙烯中，密封保存，此溶液每毫升含1.00mg二氧化硅；

（5）标准曲线的绘制，取二氧化硅标准溶液0、0.10、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00mL，分别移于50mL比色管中，加水稀释至标线，迅速依次加入1+1盐酸溶液1.0mL与钼酸铵试剂2.0mL，充分混匀，然后放置10—15min，加入2.0mL草酸溶液，充分混匀，5—10min后，在分光光度计吸收峰为650—660nm处，用10mm比色皿，以水为参比，测定吸光度，经空白校正后绘制校准曲线；

（6）水样的测定，取适量清澈透明水样于50mL比色管中，按照与校准曲线绘制相同的操作方法进行测定；如果水样具有颜色，则取水样2份，1份测试用，另外1份不加钼酸铵，其余操作均与校准曲线绘制相同；由前者测得的吸光度，减去不加钼酸铵的水样的吸光度后，查得最终含量，消除色度的干扰。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

（1）冷冻—干燥：-80℃冷冻48h，干燥后样品含水率保持在3%，样品放置在自封口袋内密封，26℃平衡24h，过120目筛；

（2）称取样品200mg放入50mL聚丙烯离心管中；

（3）加入5mL10%的H₂O₂于离心管中，静置30min，然后再加5mL1mol/LHCL，超声40kHz振荡30min；

（4）加20mL去离子水，在离心率4300g下离心5min后倒掉上清液，沉积物质不可扰动，如果出现沉积物质扰动，可重复加水离心2—3次，将含有沉积物质的离心管置于55℃烘箱中烘10h；

（5）准确吸取40.0mL2mol/LNa₂CO₃于步骤（4）的离心管中，超声40kHz振荡5min后放在83℃的水浴锅中恒温加热；

（6）以2h为间隔搅拌溶液，5h后取出管子，并迅速在4300g下离心5min；

（7）快速移出5mL上清液，并保存在聚丙烯管中以备测定。