[发明专利]一种检测玉米赤霉烯酮的试纸板

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶体金检测试剂板，具体是一种检测玉米赤霉烯酮的试纸板。

背景技术

玉米赤霉烯酮ZEN又称F-2毒素，首先从有赤霉病的玉米中分离得到，其产毒菌是镰刀菌属的菌侏，主要由禾谷镰刀菌产生，粉红镰刀菌、三线镰刀菌等多种镰刀菌也能产生这种毒素。玉米赤霉烯酮有多种衍生物，如7-脱氢玉米赤霉烯酮、玉米赤霉烯酸等。玉米赤霉烯酮的耐热性较强，在食品或饲料加工过程中均不易破坏，主要污染玉米、小麦、大麦等粮谷类作物。

ZEN主要污染玉米、高粱、小麦、大麦等粮谷类作物及其制品。Toshitsugu对19个国家和地区的谷物、食品及饲料中所含的ZEN进行了调查发现，包括中国、阿根廷、加拿大、波兰及也门等众多国家和地区的样品均有不同程度的污染。借助被污染的乳制品、肉制品等动物源性食品，ZEN及其代谢产物可以进入人体，给人类的健康造成威胁。ZEN对动物及人类危害主要表现在影响和破坏生长发育及生殖系统方面，人畜误食含有该毒素的食物后，会引起雌性激素中毒症，造成生殖系统的严重损伤。此外，ZEN及其衍生物对肝脏系统，免疫系统均有很大的危害，并且有引发肿瘤的可能性。SchoentalR在进行致癌试验时发现，试验组大鼠出现由致癌剂处理而诱发的肿瘤；此外，试验组和对照组大鼠还发生了乳腺纤维瘤、腺瘤、腺癌、垂体腺癌、睾丸间质肿瘤以及子宫纤维瘤等。在其他致癌试验中也有类似情况发生，这些肿瘤所涉及的器官表明，它们可能与动物饲料中的雌激素物质有关。因此认为，它们是由污染饲料的ZEN或其代谢产物引起的。

目前大多数国家对食品、谷物、饲料中的玉米赤霉烯酮含量都有十分严格的规定。例如澳大利亚规定谷物中玉米赤霉烯酮的含量不能超过0.05mg/kg；意大利规定在谷物和谷类产品中玉米赤霉烯酮的含量不能超过0.1mg/kg；而在法国，植物油和谷类当中玉米赤霉烯酮的含量必须低于0.2mg/kg。中国则规定小麦、玉米中的玉米赤霉烯酮含量不得超过0.06mg/kg。

目前，对动物玉米赤霉烯酮中毒尚无特效药治疗，为了控制ZEN对人和动物产生的危害，必须对饲料、谷物等中玉米赤霉烯酮含量进行检测，确定是否含有玉米赤霉烯酮。目前，比较常用的ZEN检测方法有薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法-质谱法(GC-MS)、生物检测法和免疫学检测法等。薄层色谱分析法是较早用于毒素检测的一种方法，操作人员无需经过专门培训，且成本低，无需价格昂贵的仪器。但此方法所需试剂繁多，检测周期长，灵敏度不高等，已远不能满足现代检测要求。高效液相色谱法、气相色谱法-质谱法等仪器分析方法具有准确度高、灵敏性强、可微量测定等优点，且气相色谱法-质谱法可同时检测不同的镰刀菌毒素，适合于饲料中ZEN的定量分析。但设备昂贵、对样品中毒素纯度的要求较高，导致检测成本高、周期长，无法满足大批量样品快速筛选的需要，所以使用受到限制。微生物检测法虽然待检样品不需很纯，但方法专一性差，灵敏度低，主要用于定性，一般只作为化学分析法的佐证。

ELISA法是免疫学检测方法之一，具有特异、快速、灵敏度高和成本低的特点，适用于基层机构大量样品的筛选和普查。但此方法需接触ZEN标准品，不利于保护操作者的健康，且酶的活性易受温度影响，因此试剂需要低温保藏、寿命短，并易造成测定结果重复性较差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灵敏度高、操作简单的检测玉米赤霉烯酮的试纸板，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种检测玉米赤霉烯酮的试纸板，包括底板、背衬和盖板，所述背衬上依次紧密粘贴的样品吸收垫、胶体金结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述样品吸收垫、胶体金结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫的相邻各部分间有1-2mm的重叠，所述胶体金结合物释放垫包被胶体金标记的抗体，所述硝酸纤维素膜上具有检测线和质控线。

作为本发明进一步的方案：所述底板、背衬和盖板由上而下依次压制为一体。

作为本发明进一步的方案：所述胶体金标记的抗体为玉米赤霉烯酮单克隆抗体。

作为本发明进一步的方案：所述检测线包被玉米赤霉烯酮-BSA特异性结合抗原，所述质控线包被羊抗鼠多克隆抗体。

作为本发明进一步的方案：所述胶体金结合物释放垫的1/3-1/2被覆盖于样品吸收垫下。

作为本发明再进一步的方案：所述检测玉米赤霉烯酮的试纸板的制备方法，具体步骤如下：

1）制备喷涂有胶体金标记的抗体的结合物释放垫；