[发明专利]检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法

权利要求书

1.检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)胶乳微球的活化：取胶乳微球于胶乳活化缓冲液中，采用超声波进行乳化活化后，脱盐并去除残留活化物，完成活化；

2)胶乳微球与抗CD58单克隆和多克隆IgG抗体交联：于垂直混合仪中加入活化后的胶乳微球和抗异常糖基化修饰CD58分子单克隆/多克隆IgG抗体，混匀并反应后，加入甘氨酸缓冲液混合均匀，得到交联体；

3)交联体的洗涤：将交联体离心后取沉淀，用洗涤液重悬沉淀后离心取沉淀，重复3-5次，完成洗涤；

4)交联体的保存：将洗涤后的交联体沉淀于甘氨酸保存液中超声混匀，4℃保存。

2.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中胶乳微球为直径为100-165nm的聚苯乙烯胶乳微球。

3.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中胶乳活化缓冲液的配方为0.05-0.5M/LpH5.5-7.5的MES缓冲液、水、吐温-20、19.2mg/mLNHS和52mM/LEDAC。

4.根据权利要求3所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述0.05-0.5M/LpH5.5-7.5的MES缓冲液、水、吐温-20、19.2mg/mLNHS和52mM/LEDAC的配比为1:1.5:0.01-0.015:0.5-1.5:2-4。

5.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中脱盐并去除残留活化物的方法为流穿葡聚糖G-25凝胶柱方法。

6.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中活化后的胶乳微球与抗异常糖基化修饰CD58分子单克隆/多克隆IgG抗体的配比为1ml:0.1-1.2mg，所述抗异常糖基化修饰CD58分子单克隆/多克隆IgG抗体预先溶解于PB缓冲液后再与胶乳微球混合。

7.根据权利要求6所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述PB缓冲液为100mM/L，pH7.4的PB缓冲液。

8.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中甘氨酸缓冲液为0.1-1.0M/L，pH7.4的甘氨酸缓冲液。

9.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中洗涤液为内含0.1％BSA的50mM/L，pH7.4甘氨酸缓冲液。

10.根据权利要求1所述的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤4)中甘氨酸保存液为内含0.1％BSA，0.1-1.0％PVP，0.05％NaN₃的50mM/L，pH7.4甘氨酸缓冲液。