[发明专利]一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法

说明书

本发明公开了一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法，包括以下步骤：(1)将小白菜种子放置到抗生素污染的土壤中培养，培养至小白菜长出可食用部分；(2)利用体外消化法处理小白菜可食用部分得到消化产物；(3)将肝细胞接种到含有消化产物的培养基中培养，取上清液检测谷丙转氨酶的活性；(4)根据所述谷丙转氨酶的活性，评估土壤抗生素污染对人体健康影响。本发明采用体外消化法结合细胞毒性检测的方法，检测小白菜中残留的抗生素对肝细胞ALT活性的影响，进而评估土壤中抗生素污染对人体健康的影响，填补了在通过食物链研究抗生素对人体健康方面影响的空白。

技术领域

本发明涉及污染环境检测与健康评估领域，具体涉及一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法。

背景技术

随着畜禽养殖业和饲料工业的规模化发展，抗生素被广泛使用。但是绝大部分抗生素不能完全被机体吸收，以原形或者代谢物形式排入环境，经不同途径对水体和土壤造成污染，进而通过食物链危害人类健康。四环素类抗生素是在世界范围内应用最为广泛的抗生素，四环素类抗生素是由放线菌产生的一类广谱抗生素，包括土霉素、金霉素、四环素及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素、二甲胺基四环素等，其结构均含有并四苯基本骨架。近年来土霉素被广泛应用于畜禽的生长，导致其药物残留问题日趋严重，排放到环境中的药物及其潜在的影响也引起越来越多的关注。

目前对抗生素的生态健康风险的研究较少，可利用的生态毒理效应数据也较少，对于进入食物链中的抗生素对人体危害的风险还不是十分清楚。因此，控制和检测抗生素残留，研究抗生素污染的生态毒理效应是非常必要的。

申请号为201410764095.4的专利文献公开了一种土壤抗生素污染的诊断方法，包括以下步骤：(1)将肝细胞接种到一组抗生素浓度呈梯度分布的培养基中培养，培养一段时间后检测培养基中肝细胞分泌的酶的活性；(2)建立培养基中抗生素浓度与所述酶的活性之间的关系曲线；(3)将肝细胞接种到含待测土壤浸提液的培养基中培养，培养一段时间后检测相应酶的活性，根据关系曲线计算得到待测土壤中抗生素的浓度；所述酶为乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶或丙氨酸氨基转移酶。利用该方法不仅能检测土壤中抗生素的浓度，又能反映土壤中抗生素的生物毒性。

目前，抗生素污染的诊断方法都是基于土壤安全阈值进行的，而对于评价作物可食用部位的抗生素的检测方法相对较少。生物标志物法是诊断污染物污染程度和评估健康风险的一种有效手段，由于快速、灵敏等优点，体外细胞通常用来研究污染物的生物有效性与毒性，且与体内细胞有一定的相关性，从而明确污染物对健康的相对危害情况，因此体外细胞毒性指标可以被用来评估土壤-作物可食用部的食物链系统抗生素污染带来的生态风险。目前利用生物标志物法研究土壤-农作物系统抗生素污染方面还是空白。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法，通过检测谷丙转氨酶的活性评估土壤抗生素污染对人体健康影响。

一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法，包括以下步骤：

(1)将小白菜种子放置到抗生素污染的土壤中培养，培养至小白菜长出可食用部分；

(2)利用体外消化法处理小白菜可食用部分得到消化产物；

(3)将肝细胞接种到含有消化产物的培养基中培养，取上清液检测谷丙转氨酶的活性；

(4)根据所述谷丙转氨酶的活性，评估土壤抗生素污染对人体健康影响。

现有研究证明环境中抗生素污染通过食物链进入人体进而危害人体健康，蔬菜作为人们日常饮食中必不可少的食物之一，本发明通过检测蔬菜中抗生素对人体的影响，进而评估土壤抗生素污染对人体健康的影响。小白菜为蔬菜指示作物品种，是一类主要以鲜嫩的绿叶、叶柄和嫩茎为产品的速生蔬菜，具有生长期短，采收灵活的特点，故本发明采用小白菜。