[发明专利]一种竹根七组织培养快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种竹根七组织培养快速繁殖方法。

背景技术

竹根七(DisporopsisfuscopictaHance)，又名假万寿竹，为百合科竹根七属多年生植物，其干燥根茎供药用，具有养阴清肺、活血化瘀等功效。用于治疗阴虚肺燥、咳嗽咽干、产后虚劳、妇女干痨，对跌打损伤祛和骨折也有良好的治疗作用。竹根七生于林下或山谷中，主产广西、广东、福建、江西等地，因株型优美，也常作为园林绿化景观植物使用。

目前竹根七药材及种苗主要来源于野生资源，还没有人工繁育及人工种植技术的报道。为了防止竹根七野生资源遭到严重的认为破坏，保证竹根七资源的可持续利用，需要对竹根七进行种苗繁育技术研究，以保障大规模采挖后可以提供充足的种苗以资源更新的需要。

发明内容

本发明的目的是提供一种竹根七组织培养快速繁殖方法，它能够快速繁殖出大量适合移栽的优良竹根七种苗、满足生产需要。

本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种竹根七组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：

(1)外植体的选择与消毒：取竹根七健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，依次用2v/v％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1v/v％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；

(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5-4.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。

本发明的突出优点在于：

(1)采用生物技术对竹根七进行组织培养快速繁殖，在短时间内可培育出大量适合栽培种植的竹根七幼苗，保障竹根七种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

(2)采用本发明所述的培养方法得到的竹根七丛生芽增殖系数达到10-15倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根，生根率可达95％以上。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。

实施例1

本发明所述的竹根七组织培养快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤：

(1)外植体的选择与消毒：取竹根七健康植株新萌发的嫩芽作为外植体，依次用2v/v％％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1v/v％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；

(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；

(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为6.8。

实施例2

本发明所述的竹根七组织培养快速繁殖方法的另一个实例，包括以下步骤：