[发明专利]一种提高对叶百部组培苗生根率的方法

权利要求书

1.一种提高对叶百部组培苗生根率的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)、选择对叶百部顶芽作为外植体，对所述外植体进行无菌处理；

(b)、将无菌处理后的外植体切取茎尖，得到的茎尖转入诱导培养基培养28－35d，得到无菌苗；

(c)、将所述无菌苗切割为1.0～1.5cm的带芽茎段，接种于增殖培养基，诱导丛生芽，培养时间为18－25d，得到无菌芽；

(d)、将所述无菌芽切成带芽茎段，接种于生根培养基，所述生根培养基为：1/2浓度的改良MS培养基中添加NAA 1.5～2.5mg/L、IBA 0.5～3.0mg/L、氯化胆碱0～1.5g/L、蔗糖30～40g/L、琼脂5～7.4g/L；

(e)、所述生根培养基中带芽茎段长出新芽、新根即得到生根苗，将所述生根苗于常温下遮阴处炼苗处理，然后移栽到草炭或黄心土基质中；

在步骤(b)中，所述诱导培养基的成分为：改良MS培养基中添加NAA 0.2～0.5mg/L、BA0～1.0mg/L、蔗糖30～40g/L、琼脂5～7.4g/L；

在步骤(c)中，所述增殖培养基成分为：改良MS培养基中添加6－BA 1.0～2.0mg/L、KT0～1.0mg/L、NAA 0～1.2mg/L、蔗糖30～40g/L、琼脂5.0～7.4g/L；

在步骤(d)中，所述生根培养基前期在100lx弱光下培养5～7d，再进行光照培养；

步骤(b)～(d)中的培养基的pH值均为5.8～6.0，培养温度为23℃～27℃，光照时间为10～14小时/天，光照强度为1400－2000lx；

所述改良MS培养基是将MS培养基中的NH₄NO₃改为800±10mg/L、KH₂PO₄改为340±10mg/L，无水CaCl₂改为330±2mg/L，其余成分含量不变。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，选择无病害、健壮的对叶百部顶芽作为外植体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述无菌处理为：

将所述外植体用无菌水冲洗后，放在超净工作台上，用70％－75％的酒精浸泡30～40s，再用0.1％～0.2％的升汞溶液处理6～14min，无菌水清洗4～6次。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中，所述茎尖的长度为0.15－0.30mm。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中，所述诱导培养基的成分为：

改良MS培养基中添加NAA 0.4～0.5mg/L、BA 0.9～1.0mg/L、蔗糖30～32g/L、琼脂5～5.5g/L。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中，所述增殖培养基成分为：改良MS培养基中添加6－BA 1.8～2.0mg/L、KT 0.8～1.0mg/L、NAA 0.2～0.3mg/L、蔗糖38～40g/L、琼脂5.5～6.0g/L。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(d)中，所述生根培养基为：1/2浓度的改良MS培养基中添加NAA 2.3～2.5mg/L、IBA 1.0～1.2mg/L、氯化胆碱0.9～1.0g/L、蔗糖38～40g/L、琼脂5.0～5.5g/L。