[发明专利]为增加IMP脱氢酶活性的假囊酵母属的遗传修饰

权利要求书

1.一种在假囊酵母属的生物体中生产核黄素的方法，所述生物体被遗传修饰为相比于不具有遗传修饰且与所述被遗传修饰的生物体在相同条件下培养的生物体，肌苷-5’-单磷酸脱氢酶的活性增加，所述方法包括：

(ⅰ)在合适的培养基中生长所述生物体；和

(ii)从培养基分离核黄素。

2.根据权利要求1所述的方法，其中与没有所述遗传修饰且与所述被遗传修饰的生物体在相同的条件下培养的可比较的生物体相比，所述被遗传修饰的生物体能够累积更多的核黄素。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述肌苷-5’-单磷酸脱氢酶的活性增加是由于编码肌苷-5’-单磷酸脱氢酶的核酸分子的过表达。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述编码肌苷-5’-单磷酸脱氢酶的核酸分子的过表达是由强启动子来完成或通过在生物体的基因组中提供至少第二拷贝的编码肌苷-5’-单磷酸脱氢酶的核酸分子来完成。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述强启动子是GPD启动子。

6.根据权利要求3所述的方法，其中所述编码肌苷-5’-单磷酸脱氢酶的核酸分子包括选自以下组的核酸序列：

(a)根据SEQ ID No.1或2的任一的核酸序列或其功能性部分，其中所述功能性部分至少包括根据SEQ ID No.1或2任一者的核酸序列的3’末端600个核苷酸；和

(b)编码根据SEQ ID No.3的多肽或其功能性部分的核酸序列，其中所述功能性部分至少包括位于SEQ ID No:3的C-末端的200个氨基酸。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述生物体包括至少一个另外的遗传修饰。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述另外的遗传修饰导致选自下组的至少一种活性的改变：

(i)GLY1；

(ii)SHM2；

(iii)ADE4；

(iv)PRS 2,4；

(v)PRS 3；

(vi)MLS1；

(vii)BAS1

(viii)RIB 1；

(ix)RIB 2；

(x)RIB 3；

(xi)RIB 4；

(xii)RIB 5；

(xiii)RIB 7；

(xiv)FAT1；

(xv)POX1；

(xvi)FOX2；

(xvii)POT1/FOX3；

(xviii)ADE12；和

(xix)GUA1。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述另外的遗传修饰导致以下改变中的至少一种：

(i)GLY1活性增加；和/或

(ii)SHM2活性降低或消除；和/或

(iii)ADE4活性增加和/或提供作为反馈抑制抗性的版本；和/或

(iv)PRS 2,4活性增加；和/或

(v)PRS 3活性增加；和/或

(vi)MLS1活性增加；和/或

(vii)BAS1活性降低或消除；和/或

(viii)RIB 1活性增加；和/或

(ix)RIB 2活性增加；和/或

(x)RIB 3活性增加；和/或

(xi)RIB 4活性增加；和/或

(xii)RIB 5活性增加；和/或

(xiii)RIB 7活性增加；和/或

(xiv)FAT1活性增加；和/或；

(xv)POX1活性增加；和/或；

(xvi)FOX2活性增加；和/或；

(xvii)POT1/FOX3活性增加；和/或；

(xviii)ADE12活性降低或消除；和/或

(xix)GUA1活性增加。