[发明专利]一种深层王祖农氏菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物筛选技术领域，具体涉及一种深层王祖农氏菌。

背景技术

海水养殖业中的病害问题,一直是影响着水产品养殖成败的重要因素之一,其中，因纤毛虫原生动物所致的病害，其发生近年来愈加频繁，日益引起人们的关注。盾纤毛虫属一种兼性寄生纤毛虫，可在水体中自由生存，以细菌和有机碎屑为食，入侵养殖动物体后，破坏组织和细胞，可能引起养殖动物大批死亡。报道显示，我国各地工厂化养殖车间从12～26℃均可出现盾纤毛虫病，几乎全年均可发病；盾纤毛虫病在牙鲆中发病最为凶猛，控制不力会出现90％以上的死亡率。目前我国海水鱼工厂化养殖中所发现的盾纤类纤毛虫主要有弗州拟尾丝虫、蟹栖异阿脑虫、指状拟舟虫、水滴伪康纤虫、贪食迈阿密虫。另外在海参稚参养殖过程，夏季高温季节6～7月份也易发生纤毛虫病，一般在水温20℃左右，刺参幼体附板后的2～3d。感染率高，发病时间短，传染速度快，在很短时间内既可造成稚参的大规模死亡。发病的稚参在显微镜下观察，可见纤毛虫进入稚参体内，然后在稚参体内大量繁殖，造成稚参解体死亡。为防控盾纤毛虫病对我国海水养殖产业的危害，国内多家单位针对盾纤毛虫进行了防治药物的筛选，但目前水产上对该病的治疗仍集中于福尔马林、硫酸铜、硫酸锌的使用，这些药物基本作用于蛋白变性，其虽然可以杀死水体中盾纤毛虫，但很难根治杀死在养殖动物体内的盾纤毛虫，而且这些药物对鱼和人体细胞没有鉴别能力，同样可以发挥作用，引起严重后果。

为安全有效治疗纤毛虫病，开发微生物类生防细菌是理想方法之一。在自然界，存在着许多对病原害虫有致病作用的微生物，利用这种致病性来防治病原害虫是一种有效的生物防治方法。随着现代生物技术和基因工程的发展以及它们在药物中的应用，高效、低毒、无残留的微生物防治已成为生物农药研制中较为活跃的研究领域之一。微生物杀虫剂就是利用微生物的活体及其代谢产物制成的。从微生物中筛选出施用方便、药效稳定、对人、养殖动物和环境安全的菌种，进行工业规模的生产开发，从而制成微生物杀虫剂。微生物杀虫剂的特点主要是对脊椎动物、人体和环境无害，且防病对象不易产生抗药性，微生物杀虫剂可以说是一种环保生物农药。另外微生物在生态环境中定植后可以自然繁殖，长期发挥杀灭病原害虫的目的，这是任何其它药物所不具备的特点。但目前利用微生物来拮抗防治海水养殖动物病原性盾纤毛虫还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供能够杀灭海水养殖动物病原性盾纤毛虫的微生物深层王祖农氏菌，从而弥补现有技术的不足。

本发明提供的深层王祖农氏菌(ZunongwangiaprofundaIO-125)IO-125，已经保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCCNo.9078，保藏日期为2014年04月18号。

该菌为革兰氏阴性菌，其接触酶反应为阴性，氧化酶反应为阴性，在MA培养基(Difco，货号：212185)上形成微黄色菌落，菌落圆形中间微凸起；该菌ONPG、明胶液化、精氨酸双水解酶实验反应为阳性，发酵葡萄糖、甘露醇、肌醇、山梨醇、蔗糖、苦杏仁苷、阿拉伯糖产酸。

本发明的深层王祖农氏菌用于制备防治盾纤毛虫的制品；

所述的制品，为微生物菌液或菌粉；或是培养液的上清液。

本发明的深层王祖农氏菌IO-125(ZunongwangiaprofundaIO-125)在与海水养殖动物盾纤毛虫病原共培养时，能够在24小时内杀灭共培养体系中95％以上的盾纤毛虫，该菌株的发现为防治海水养殖动物盾纤毛虫病提供了新思路。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的方法进行详细的描述，其中述实施例中所使用的实验方法，如无特殊说明均为常规方法。

使用的海水2216E液体培养基，其配比如下：酵母提取物1g，蛋白胨5g，磷酸铁0.1g，琼脂20g，pH7.6～7.8，1L陈海水。

实施例1IO-125菌株的筛选培养