[发明专利]一种抗SS-A(Ro60)抗体试剂盒及其检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及磁微粒化学发光免疫诊断领域，特别是涉及一种抗SS-A(Ro60)抗体试剂盒及其检测方法。

背景技术

干燥综合症A型抗原SS-A(Ro60)是细胞中的一类小核糖核酸-蛋白质复合物，主要存在于细胞质中，是由蛋白质(简称Ro蛋白）和一组YRNA组成的。此核糖核酸蛋白质复合物至少由分子量为52kD和60kD的两个Ro蛋白质组成。抗SS-A(Ro60)抗体作为抗可提取核抗原抗体（extractablenuclearantigen，ENA）中的抗体之一，与原发性干燥综合症（primarySj?grensyndrome,PSS）、系统红斑狼疮（systemiclupuserythematosus，SLE）、干燥综合症（Sj?grensyndrome,SS）、新生儿红斑狼疮（neonatallupuserythematosus,NLE）、类风湿性关节炎（Rheumatoidarthritis,RA）等结缔组织疾病密切相关。因而抗SS-A(Ro60)抗体的检测对结缔组织疾病的诊断和鉴别诊断具有极其重要的意义。

目前对于抗SS-A(Ro60)抗体的检测方法已有报道，对于此病的检测方法主要为间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法，但这些方法都存在着不足之处；

一、间接免疫荧光法

该法的基本原理是血清样本中的特异性抗体与切片中的抗原特异性结合后，继用间接荧光抗体，与抗原抗体复合物结合，形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下，根据复合物的发光情况来确定所检测的结果。该方法评价：由于结合在抗原抗体复合物上的荧光素抗体增多，发出的荧光亮度强，因而其敏感性强。但是其不足也是明显的：

（1）运用此法是有可能出现假阳性的。

（2）在分析结果时无法根据分子量的大小区分非特异性反应。

（3）操作相对复杂，需要价格较昂贵的荧光显微镜，在很多基层医院难以推广，同时，不适用于样本量较大的实验室和诊断医院。

（4）荧光测定中的本底较高，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难。

（5）结果判定需要有经验的专业人员，分析结果的客观性不足。

二、酶联免疫吸附法

ELISA检测抗SS-A(Ro60)抗体，简便易行，特异性高，与间接免疫荧光法联合检测，可为临床对抗核抗体的诊断和治疗提供更为客观的实验依据。但与其他生物检测或免疫检测比较，这种ELISA检测方法、技术、工具或产品仍有较多的不足而使其应用受限，这些不足主要包括以下几个方面：

（1）检测试剂在检测过程中为开放方式，不但容易受外界环境的影响，而且容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果；

（2）ELISA检测范围和灵敏度都比较低。

（3）ELISA方法的检测时间较长，完成一个测试一般需要2个小时以上，不能完全满足临床上的快速诊断的需求。

（4）ELISA方法不能随机进样检测，检测结果存在滞后性。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种抗SS-A(Ro60)抗体试剂盒及其检测方法，具有稳定性好，灵敏度高，重复性好等优点。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种抗SS-A(Ro60)抗体试剂盒，包括生物素化SS-A(Ro60)抗原、校准品、质控品、AP-抗人IgG抗体、磁微粒试剂、化学发光底物和清洗液，所述生物素化SS-A(Ro60)抗原为偶联有生物素的SS-A(Ro60)抗原，所述AP-抗人IgG抗体是AP标记的抗人IgG抗体，所述磁微粒试剂是表面有亲和素的纳米磁微粒悬浮液。

在本发明一个较佳实施例中，所述生物素化SS-A(Ro60)抗原是生物素与SS-A(Ro60)抗原分子表面的-NH₂基团反应得到的。

在本发明一个较佳实施例中，所述校准品是由含有抗SS-A(Ro60)抗体的人血清配制而成，用于得到校准曲线；所述质控品是由含有抗SS-A(Ro60)抗体的人血清配制而成。

在本发明一个较佳实施例中，所述磁微粒试剂中磁微粒的直径为0.1-0.5μm，所述磁微粒试剂具有超顺磁性。

在本发明一个较佳实施例中，所述化学发光底物中包括有3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐AMPPD，在碱性磷酸酶的催化下释放光子。