[发明专利]用离子液体调控溶菌酶溶解度制备溶菌酶晶体的方法在审
申请号: | 201510789994.4 | 申请日: | 2015-11-17 |
公开(公告)号: | CN105255847A | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 王占忠;党乐平;张笑;陈柏如;于小婷 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N9/36 | 分类号: | C12N9/36 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 离子 液体 调控 溶菌酶 溶解度 制备 晶体 方法 | ||
1.用离子液体调控溶菌酶溶解度制备菌溶酶晶体的方法,其特征是包括以下步骤:
(1)配制含NaCl的pH值为4~6的缓冲溶液,所述NaCl的质量含量为2%~5%;
(2)向步骤(1)获得的缓冲溶液中加入水溶性咪唑基离子液体使质量终浓度为1%~5%;加入鸡蛋清溶菌酶,使所述鸡蛋清溶菌酶在20~30℃下过饱和比为1.5~4.5;
(3)在搅拌速度为200~350rpm的条件下,将步骤(2)获得的液体以5~10℃/min的冷却速率降温至10~15℃并维持20~40min,然后2-4h之内将温度降至3~5℃,并保持5~8h,过滤,晶体在-40~-50℃冷冻干燥,得溶菌酶晶体;4℃低温保藏。
2.根据权利要求1所述的用离子液体调控溶菌酶溶解度制备溶菌酶晶体的方法,其特征是所述缓冲溶液为磷酸氢二钾和磷酸二氢钾缓冲溶液,或乙酸和乙酸钠缓冲溶液。
3.根据权利要求1所述的用离子液体调控溶菌酶溶解度制备溶菌酶晶体的方法,其特征是所述水溶性咪唑基离子液体为1-丁基-3甲基咪唑四氟硼酸、1-丁基-3甲基咪唑氯或1,3-二甲基咪唑碘。
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