[发明专利]交联引导组织再生膜及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医疗材料领域，特别是涉及一种交联引导组织再生膜及其制备方法。

背景技术

引导组织再生技术(Guided Tissue Regeneration，GTR)是目前能够有效治疗牙周病的一种最为先进的治疗方法，其技术关键是利用生物屏障膜即组织再生引导膜的空间隔离作用，防止牙龈上皮和结蹄组织细胞向根面迁移，同时选择性地使牙周细胞和牙槽骨细胞粘附于根面并分化形成牙周新附着，因此引导膜的作用至关重要。随着GTR技术在临床越来越广泛的应用，引导膜的类型及性能已成为制备其发展的关键因素。

传统的临床所用的引导膜主要分为可吸收和不可吸收两类。由于不可吸收引导膜如膨化聚四氟乙烯植入后需要二次手术取出，给病人带来不必要的痛苦和经济心理负担，因此可吸收引导膜逐渐成为今后GTR发展的主要趋势。目前用于临床的可降解材料以胶原为主，这主要是因为胶原本身是动物组织的组成成分，因而具有良好的生物相容性和生物活性。但是胶原也存在明显的缺点，力学性能差，降解速度过快，不能为受伤组织提供足够的空间支持。

对于交联引导组织再生膜，主要的功能是提供缺损骨组织生长修复所需的足够时间的空间支持，这只要是因为牙槽骨的生长很缓慢，通常需要4个月以上，因而这就要求引导膜在满足生物安全性的同时还必须尽可能的延长材料的降解性能，为牙槽骨的修复提供足够长时间的空间支持。目前临床上主流产品胶原膜的降解周期为1～2个月，但这与实际的临床要求仍有较大差距。

发明内容

基于此，有必要提供一种降解周期相对较长的交联引导组织再生膜及其制 备方法。

一种交联引导组织再生膜的制备方法，包括如下步骤：

对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片；

对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理，得到交联引导组织再生膜前体，其中，所述脱细胞处理的操作为：对所述真皮层皮片依次进行低渗-高渗盐处理、酶处理以及去污剂处理；以及

将所述交联引导组织再生膜前体置于pH为2～6、质量百分浓度为0.1％～5％的交联剂溶液中，在4℃～37℃下交联1小时～3天，交联反应结束后洗净，预冷后冷冻干燥、灭菌，得到交联引导组织再生膜。

在一个实施例中，所述对哺乳动物的皮肤进行预处理后得到真皮层皮片的操作为：用机械法对所述哺乳动物的皮肤进行初步脱脂及除毛，接着用取皮机将所述哺乳动物的皮肤去掉0.1mm～0.4mm的表皮与皮下脂肪组织后制成厚度为0.2mm～1mm的真皮层皮片。

在一个实施例中，所述哺乳动物的皮肤为猪、牛、羊或马的皮肤。

在一个实施例中，还包括在对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作之前，将所述真皮层皮片浸泡在0℃～8℃的抗生素溶液中过夜的操作；

所述抗生素溶液的溶质为青霉素-链霉素、庆大霉素、妥布霉素、万古霉素或替考拉宁；

所述抗生素溶液的质量百分浓度为0.001％～0.1％。

在一个实施例中，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述脱细胞处理的操作具体为：将所述真皮层皮片分别在质量百分浓度为0.1％～0.9％氯化钠和质量百分浓度为1.0％～10％氯化钠溶液中循环浸泡1次～3次，每次浸泡的时间为4h～12h，再将所述真皮层皮片浸泡在质量浓度为0.1％～1.0％的胰蛋白酶溶液或中性酶溶液中，置于5℃～37℃摇床中摇12h～48h，接着将所述真皮层皮片在质量浓度为0.1％～1％的去污剂溶液中5℃～37℃洗涤2次～8次，每次洗涤的时间为2h～10h，最后用PBS或者生理盐水清洗所述真皮层皮片4次～10次，每次清洗的时间为2h～10h；其中，所述去污 剂为十二烷基磺酸钠、曲拉通或3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸。

在一个实施例中，对所述真皮层皮片依次进行脱细胞处理、病毒灭活处理和致密收缩处理的操作中，所述病毒灭活处理的操作具体为：将所述真皮层皮片浸入质量百分浓度为0.5％～5％的过氧化氢的乙醇溶液或过氧乙酸的乙醇溶液中，室温下浸泡30min～480min，随后用纯水清洗，并将所述真皮层皮片按照上表皮层朝上、下表皮真皮层朝下的方式固定后-80℃～-20℃预冷2h～12h，最后冷冻干燥24h～48h，其中，所述过氧化物为过氧化氢或过氧乙酸。