[发明专利]检测试剂及其应用及含有该试剂的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及活化部分凝血活酶时间APTT测定试剂及其应用及含有该试剂的试剂盒。

背景技术

在临床检验方面，医院各科室对于止血和血栓方面的检测取得了广泛的认识，止血和血栓方面的检测已经给临床医师对于疾病的诊断、疗效的观察、抗凝剂用量的检测和预后提够了大量可靠的数据支持，随着国内人们对于这方面的了解和重视，越来越多的检测手段被用于其中。

人体凝血途径分为内源性凝血途径和外源性凝血途径，而活化部分凝血活酶时间(APTT)是用于检测人体内源性凝血途径是否正常的一个重要指标，如果部分内源性凝血因子(如VII,VIII,IX,XI)缺乏，就会导致APTT延长。APTT也同样用于对于抗凝血药物肝素用量的监测。

APTT测定原理是将待测血浆和APTT试剂一起37℃混匀预温一定时间，然后加入钙离子，启动内源性凝血途径，促使纤维蛋白原转变成纤维蛋白而凝固，测定凝固时间即为活化部分凝血酶时间。现有市场上常用的液体APTT试剂多用鞣花酸作为激活剂，此类物质对于肝素的敏感性较低，且稳定性不好。因此，提供一种APTT的检测试剂具有重要的现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种活化部分凝血活酶时间APTT测定试剂及其应用及含有该试剂的试剂盒，该活化部分凝血活酶时间APTT测定试剂，具有高稳定，同时对凝血因子的缺乏具有高灵敏度的优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种检测试剂，包括白陶土、脑磷脂、缓冲液、牛血清白蛋白(BSA)、甘氨酸、葡聚糖、NaN₃。

在本发明的一些具体实施方案中，所述检测试剂中所述白陶土、脑磷脂、缓冲液、牛血清白蛋白(BSA)、甘氨酸、葡聚糖、NaN₃的质量比为(0.5～10)：(0.2×10-3～1.0×10-3)：(0.05～2)：(1～20)：(4～40)：(0.1～1)：(0.1～1)。

在本发明的一些具体实施方案中，所述检测试剂还包括水。

在本发明的一些具体实施方案中，所述检测试剂中所述脑磷脂选自兔脑磷脂、猪脑磷脂或牛脑磷脂。

在本发明的一些具体实施方案中，所述检测试剂中所述缓冲液为Tris-Hcl缓冲液、hepes缓冲溶液、磷酸盐缓冲溶液或硼酸盐缓冲溶液。

在本发明的一些具体实施方案中，所述检测试剂中所述葡聚糖的分子量为40000。

在本发明的一些具体实施方案中，1L所述检测试剂中包括如下组分：

本发明还提供了所述检测试剂在制备检测活化部分凝血活酶时间(APTT)的检测工具中的应用。

本发明还提供了一种检测活化部分凝血活酶时间的试剂盒，包括所述检测试剂。

本发明还提供了所述检测试剂或所述试剂盒的使用方法，取待测血浆与所述检测试剂混合，再与钙离子混合，测定凝固所需时间，即得待测血浆的活化部分凝血酶时间。

本发明提供的检测试剂的制备方法为称取白陶土溶于去离子水中，搅拌后，15～35℃下静止5-15h，抽取上清混悬液100ml备用。将上述静置好的混悬液加入到Tris-HCL缓冲液中，搅拌，直到整个液体呈现均一的白色混悬液，然后加入磷脂，葡聚糖4w，叠氮钠，BSA，Gly搅拌混匀，该液体即为APTT试剂。

在本发明的一些具体实施方案中，检测试剂的制备方法为称取5-20克白陶土溶于100ml水中，搅拌2-4h后，常温下静止5-15h备用。将上述静置好的混悬液100ml加入到900ml50-300mmol/L的pH为7.0的Tris-HCL缓冲液中，搅拌30～60min，直到整个液体呈现均一的白色混悬液，然后加入0.6-2.0g磷脂，0.5-1.5g葡聚糖4w，0.5-1.0g叠氮钠5-15gBSA，4-20gGly搅拌20-60min混匀，该液体即为APTT试剂。

本发明提供了一种检测试剂，包括白陶土、脑磷脂、缓冲液、牛血清白蛋白(BSA)、甘氨酸、葡聚糖、NaN₃。本技术相比现有技术具有以下优点，本发明APTT试剂盒通过调整保护液的组分和比例，使APTT试剂的稳定性很好，4℃放置可以稳定18个月，37℃放置可以稳定15天，开瓶后置于4℃可以稳定50天，在产品的稳定性上显著(P＜0.05)优于一般的市售产品，为医院节约了成本,提供了很好的试剂来源。

具体实施方式