[发明专利]一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法及应用，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将直径为4mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨，超纯水清洗干净；将3~8μL、0.5~2mg/mLAuAg异质合金液滴加到电极表面，室温下晾干成膜；

（2）依次滴加6μL环境雌激素抗体，6μL、质量分数为0.5%~2.5%的牛血清白蛋白BSA溶液于电极表面，封闭电极表面上非特异性活性位点，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；

（3）滴加6μL、0.003~5ng/mL的一系列不同浓度的环境雌激素抗原标准溶液至电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；

（4）滴加6μL氮掺杂石墨烯与环境雌激素抗体孵化物Ab-N-GS于电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干。

2.如权利要求1所述的一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法及应用，所述的AuAg异质合金，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将0.001~1mL、0.05~0.1mol/L氯金酸，0.01mL、0.05~0.5mol/L硝酸银和0.1~5mL、0.1~3.5mol/L的聚二烯丙基二甲基铵盐酸盐PDDA加入到20~200mL的乙二醇溶液中，混合均匀；

（2）将混合溶液在60~185℃下反应20~100h，将所得固体用超纯水洗涤、在10000~15000r/min下离心3次，35~55℃下在真空干燥箱干燥2~24h，得到AuAg异质合金。

3.如权利要求1所述的一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法及应用，所述的氮掺杂石墨烯与环境雌激素抗体孵化物Ab-N-GS，其特征在于，包括以下步骤：

（1）称取20~100mg的氧化石墨烯，分散于30~100mL的超纯水中，并加入50~300mL的N,N-二甲基甲酰胺DMF，充分摇匀，超声0.5~5h；

（2）将混合液在130~160℃下反应0.5~5h，反应结束后，8000~10000r/min下离心10~30min，所得固体在40~60℃下，于真空干燥箱干燥12~48h得到氮掺杂石墨烯N-GS；

（3）将0.1~0.5gN-GS加入到5~15mL无水乙醇中，加入0.1~3mL3-氨丙基三乙氧基硅烷，50~85℃回流0.5~5h，将所得固体在8000~10000r/min下离心10~30min，所得固体在40~60℃下，于真空干燥箱干燥12~24h，制得氨基化N-GS；

（4）将所得氨基化N-GS分散于10~100mL超纯水中，加入0.01~10mL的戊二醛和0.01~10mL、100μg/mL的环境雌激素抗体，室温下振荡12h。

4.如权利要求1所述的一种基于氮掺杂石墨烯标记的环境雌激素传感器的制备方法及应用，所述的环境雌激素选自下列之一：雌二醇，炔诺酮，己烯雌酚，雌酮，雌三醇，炔雌醇。