[发明专利]一种含黑色素的体外皮肤测试模型及其制备方法

权利要求书

1.一种含黑色素的体外测试皮肤模型，其特征在于：该皮肤模型包含真皮层和表皮层；所述真皮层包含：6～10层成纤维细胞及成纤维细胞自身分泌的细胞外基质；所述表皮层包含：由黑色素细胞和角质细胞所形成的基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层。

2.权利要求1中所述含黑色素的体外测试皮肤模型的制备方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

步骤一、真皮层的构建：

在聚酯纤维膜上加入明胶或基质胶，孵育后30分钟后，再加入成纤维细胞，进行浸没培养，置37℃条件下培养24~36小时，促进其形成成纤维细胞膜片，并多次接种产生6~10层成纤维细胞及其分泌的大量细胞外基质的真皮层结构；

步骤二、表皮层的构建：

在步骤一所述的真皮层上加入角质细胞和黑色素细胞的混悬液，进行浸没式培养，每天换液，形成含黑色素细胞的表皮层结构；

步骤三、体外测试皮肤模型的体外培养：

将含有表皮层和真皮层的体外测试皮肤模型进行气-液面培养，获得所述皮肤模型。

3.如权利要求书2所述的含黑色素的体外测试皮肤模型，其特征在于：所述的真皮层的构建采用多次接种技术形成膜片，其接种次数在2～8次之间，优选接种次数为3次，成纤维细胞的接种密度为2×10⁵/cm²。

4.如权利要求书2所述的含黑色素的体外测试皮肤模型，其特征在于：所述的表皮层构建中黑色素细胞和角质细胞的比例在1：5～1：30之间，优选黑色素细胞和角质细胞的比例1:15，接种的细胞密度为2.5×10⁶/cm²。

5.如权利要求1所述的含黑色素的体外测试皮肤模型，其特征在于：该皮肤模型可用于检测化学品对皮肤的影响，其中所述化学品包括药品、生物制剂、化妆品原料及成品、保健品原料。

6.如权利要求1所述的含黑色素的体外测试皮肤模型，其特征在于：该皮肤模型可用于检测药品、生物制剂、化妆品成品原料、保健品原料的美白祛斑功效。