[发明专利]核酸扩增反应装置和核酸扩增方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种核酸扩增反应装置和核酸扩增方法。

背景技术

近年来，随着基因利用技术的发展，基因诊断、基因治疗等利用基 因的医疗受到瞩目，除此之外，在农业、畜牧业领域也开发出多种将基 因用于品种鉴别、品种改良的方法。作为用于利用基因的技术，PCR(聚 合酶链式反应，PolymeraseChainReaction)法等核酸扩增技术正在广 泛普及。近年来，开发了能够用更短的时间得到核酸扩增反应产物的 PCR装置(例如，专利文献1)。核酸扩增反应用试剂的制备中，重要 的是氯化镁浓度的设定，若低浓度则收量减少，若高浓度则阻碍核酸扩 增反应或可能成为非特异性扩增的原因。在众多的已知种类的市售品 中，进行核酸扩增的反应液中的氯化镁的推荐浓度为1.5mM(例如，参 照非专利文献1、2)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2012-115208

非专利文献

非专利文献1：东洋纺株式会社Lifescience事业部，PCR相关故障 分析的网页，http://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/lifescience/ products/product/jisshirei/archives/2008/04/post_21.html

非专利文献2：Lifetechnologies公司，TaqDNA聚合酶和 PlatinumTaq抗体的说明书，6页，http://tools.lifetechnologies.com/ content/sfs/productnotes/f_050711_taq-ts-tl-mkt-hl.pdf

发明内容

发明人在使用了上述的PCR装置的核酸扩增反应中，发现如果缩 短反应时间，特别是缩短退火时间或退火和延伸时间，则与反应时间长 的情况相比得不到足够量的核酸扩增反应产物。因此本发明的课题在于 提供一种即使反应时间短也能够得到足够量的核酸扩增反应产物的核 酸扩增反应装置和核酸扩增方法。

本发明是为了解决上述课题中的至少一部分而进行的，能够以以下 方式实现。

本发明的一个实施方式是一种核酸扩增反应装置，包含：安装部， 可安装填充有核酸扩增反应液和比重小于核酸扩增反应液且不与核酸 扩增反应液混合的液体的核酸扩增反应容器；第1加热部，将核酸扩增 反应容器的第1区域加热到第1温度；第2加热部，将核酸扩增反应容 器的第2区域加热到第2温度；驱动机构，对第1配置和第2配置进行 切换，其中，上述第1配置为第1区域在重力作用的方向位于第2区域 的下方，上述第2配置为第2区域在重力作用的方向位于第1区域的下 方；并且，核酸扩增反应液的镁离子浓度为1.8mM～9.0mM。核酸扩增 反应液的镁离子浓度可以为2.0mM～7.5mM。核酸扩增反应装置进一步 具有控制驱动机构的控制部，控制部保持上述第1配置的时间可以为4.5 秒以下，保持上述第2配置的时间可以为18秒以下。控制部保持上述 第1配置的时间可以为4秒以下。控制部保持上述第2配置的时间可以 为6秒以下。

本发明的另一实施方式是一种核酸扩增反应用筒，上述核酸扩增反 应用筒具备：管、核酸扩增反应用容器和柱塞，其中，上述管在其内部 依次具备由第1油构成的第1塞子、由不与油混合的、对结合有核酸的 核酸结合性固相载体进行清洗的清洗液构成的第2塞子、由第2油构成 的第3塞子、由不与油混合的、从结合有核酸的核酸结合性固相载体溶 出上述核酸的溶出液构成的第4塞子、由第3油构成的第5塞子、由不 与油混合的、进行核酸扩增反应的核酸扩增反应液构成的第6塞子、由 第4油构成的第7塞子，上述核酸扩增反应用容器与管的第7塞子侧连 通，且包含油，上述柱塞安装于管的第1塞子侧的开口部，从管的第7 塞子侧向核酸扩增反应用容器推出液体，并且，溶出液和核酸扩增反应 液的混合液的镁离子浓度为1.8mM～9.0mM。