[发明专利]一种针对肿瘤治疗的DNA超晶格纳米载药分子的制备方法在审

专利信息
申请号: 201510802843.8 申请日: 2015-11-19
公开(公告)号: CN105381464A 公开(公告)日: 2016-03-09
发明(设计)人: 何丹农;王萍;刘婷;夏智伟 申请(专利权)人: 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
主分类号: A61K47/02 分类号: A61K47/02;A61K47/26;A61P35/00
代理公司: 上海东方易知识产权事务所 31121 代理人: 唐莉莎
地址: 200241 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 针对 肿瘤 治疗 dna 晶格 纳米 分子 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种针对肿瘤治疗的DNA超晶格纳米载药分子的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)DNA四面体(TDN)结构的制备:

将四条单链(50μM)分别取2μL加入到42μLTris-MgCl2(Tris10mM,MgCl250mM,pH8)溶液中并置于PCR仪内,将温度迅速升到95℃稳定10分钟再冷却至4℃稳定30分钟便可得到高产率的DNA四面体(2uM);

(2)粒径为4nm的纳米金粒子的制备:

取10ml浓度为2.5*10-4M的柠檬酸钠溶液放入50ml圆底烧瓶中,加入28ul高氯酸(30mg/ml),最后在搅拌下加入0.3ml新配制的硼氢化钠(0.1M)溶液,即得到粒径为4nm的纳米金溶液;

(3)DNA四面体(TDN)与金纳米粒子的结合:

取将400ul金纳米粒子离心用30K超滤管滤去多余的溶剂,取沉淀用100ulPBS(10mMpH7.4)溶解,然后加入2ulTDN(2uM),静置过夜;

(4)DNA超晶格结构的合成:

取1μLi-motif的互补链加入上述溶液中,混匀并在PCR中60度反应10分钟并迅速降至37度保持2小时。

2.根据权利要求1所述一种针对肿瘤治疗的DNA超晶格纳米载药分子的制备方法,其特征在于,通过改变DNA四面体与金纳米粒子的摩尔比,改变超晶格结构的大小程度。

3.根据权利要求1所述一种针对肿瘤治疗的DNA超晶格纳米载药分子的制备方法,其特征在于,最终退火温度选择迅速降温,或选择逐步缓慢降温。

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