[发明专利]一种提高转Bt基因棉花外源杀虫蛋白含量的方法

说明书

本发明涉及植物生化领域，具体涉及一种提高转Bt基因棉花外源杀虫蛋白含量的方法。所述方法包括步骤：在棉田每代棉铃虫高峰期前5‑7天叶面喷施浓度为10‑200mg/L的生长素IAA(吲哚丁酸)或生长素类似物IBA(吲哚丁酸)溶液。所用化学诱导物质成本低，容易购买，使用方法简单和可操作性强。

技术领域

本发明涉及植物生化领域，具体涉及一种提高转Bt基因棉花外源杀虫蛋白含量的方法。

背景技术

棉花(Gossypium L.)是世界性的重要经济作物和纤维作物。自1997年转Bt基因棉花的大面积推广种植，转Bt棉对棉铃虫取得了良好的控制作用。转Bt基因棉花抗虫的物质基础是外源蛋白的表达，Bt蛋白的表达受棉株生长发育及环境变化的调控，且对调控因素具有高度的依赖性。转Bt棉花表达的Bt蛋白除了随棉花生长发育进程而呈现前期表达量高后期表达量低的特点外，外界逆境高温、干旱、涝渍、盐碱胁迫及栽培措施均会降低Bt蛋白的表达，进而影响其抗虫性的水平。同时但随着转Bt基因抗虫棉面积不断扩大，种植转Bt基因棉花时间的延长，棉铃虫对转Bt基因抗虫棉产生抗毒性不可避免。因此除了栽培管理措施外，有必要研究一种以化学诱导形式提高转Bt基因棉花外源蛋白表达量的物质，在棉花的中后期进行外源蛋白表达量诱导提高，以达到抗虫效果提高的目的。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高转Bt基因棉花外源杀虫蛋白含量的方法。

根据本发明的方法，包括以下步骤：在棉田每代棉铃虫高峰期前5-7天叶面喷施浓度为10-200mg/L的生长素或生长素类似物溶液。

根据本发明的具体实施方式，在棉田每代棉铃虫高峰期前5-7天叶面喷施浓度为10-200mg/L的生长素IAA(吲哚丁酸)或生长素类似物IBA(吲哚丁酸)溶液，每世代棉铃虫发生期每隔6-8天喷施1次，连续喷2次，优选喷施浓度20-30mg/L。

根据本发明的，研究了植物生长素或生长素类似物对转Bt基因棉花喷施后化学诱导外源Bt蛋白表达的用量及其使用方法，所用化学诱导物质成本低，容易购买，使用方法简单和可操作性强。

具体实施方式

种植转Bt基因棉花中棉所45和中棉所79，在棉铃虫2代发生高峰期前5天，分别选择生长素IAA(吲哚丁酸)和生长素类似物IBA(吲哚丁酸)5mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L、200mg/L和250mg/L进行试验，喷施前进行取样，喷施后1天、3天、5天、7天、9天和11天分别进行取样检测外源Bt蛋白含量。检测结果如表1。

由表1可见，中棉所45棉花在生长素和生长素类似物20mg/L和30mg/L浓度时，喷施后1-5天期间，外源蛋白含量较对照增加量上升，第六天开始增加量下降，至第11天后基本与对照相等；增加的趋势在中棉所45和中棉所79两个棉花品种上基本一致；其他浓度在不同的时间对外源蛋白增加量差异较大，在两个棉花品种差异也较大，表现出不稳定的状态。可见，在棉花生长期，根据田间害虫检测情况，在棉铃虫发生高峰期前5天进行喷施20mg/L-30mg/L的生长素IAA(吲哚丁酸)和生长素类似物IBA(吲哚丁酸)于棉花叶面上，则对转基因棉花提高自身外源蛋白含量和对棉铃虫幼虫抗虫性有很重要的作用。

表1 喷施生长素类似物不同时间叶片外源蛋白含量

表1-续

表2 喷施生长素不同时间叶片外源蛋白含量

表2-续