[发明专利]一种快速中止CAR-T细胞杀伤作用的分子刹车及其用途

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体，依次包含信号肽、单链抗体、胞外铰链区1、跨膜区和胞内信号区，

其中，所述单链抗体包括轻链可变区、重链可变区以及连接它们的铰链区2，

其中，所述单链抗体插入和/或连接有抗原表位；

所述抗原表位的插入和/或连接并不降低或者阻断所述单链抗体与其所针对的抗原的特异性结合；但是当所述抗原表位与其特异性抗体结合后，能够降低或者阻断所述单链抗体与其所针对的抗原的特异性结合；

所插入和/或连接的抗原表位为单拷贝、2拷贝或3拷贝；

所述抗原表位插入和/或连接的位置为一个或者多个；当所述位置为多个时，不同位置的抗原表位相同或者不同；

其中，抗原表位插入和/或连接的位置为：

轻链可变区和铰链区2之间；

轻链可变区和铰链区2之间和铰链区2和重链可变区之间；

轻链可变区和铰链区2之间和单链抗体之前；

或者，

轻链可变区和铰链区2之间、铰链区2和重链可变区之间和单链抗体之前；

其中，

所述的单链抗体，其轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:22所示，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示，铰链区2的氨基酸序列为SEQ ID NO:24或者SEQ ID NO:25所示；

所述抗原表位为CD20的抗原表位，并且所述CD20的抗原表位的氨基酸序列如SEQ IDNO:26所示，或者如SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28所示。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述抗原表位与单链抗体直接相连或者通过蛋白linker相连。

3.根据权利要求2所述的嵌合抗原受体，其中，所述蛋白linker为至少2个甘氨酸。

4.根据权利要求3所述的嵌合抗原受体，其中，所述蛋白linker为2、3、4、5、6、7、8、9或10个甘氨酸。

5.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其包含如下的(1)至(4)项中的任意一项或者多项：

(1)所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:29所示；

(2)所述胞外铰链区1选自CD8的胞外铰链区、CD28的胞外铰链区和CD4的胞外铰链区的任意一种或多种；

(3)所述跨膜区选自CD8的跨膜区、CD28的跨膜区和CD4的跨膜区的任意一种或多种；

(4)所述胞内信号区选自CD28、CD134/OX40、CD137/4-1BB、LCK、ICOS、DAP10、CD3ζ和FcεRIγ任意一种或多种的胞内信号区。

6.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，第(2)项中，所述胞外铰链区1为CD8的胞外铰链区。

7.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，第(2)项中，所述CD8的胞外铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO:30所示。

8.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，第(3)项中，所述跨膜区为CD8跨膜区。

9.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，第(3)项中，所述CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:31所示。

10.根据权利要求5所述的嵌合抗原受体，其中，第(4)项中，所述胞内信号区为4-1BB胞内信号区和CD3ζ胞内信号区，或者为CD28胞内信号区和CD3ζ胞内信号区。

11.根据权利要求10所述的嵌合抗原受体，其中，所述4-1BB胞内信号区和CD3ζ胞内信号区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:32和SEQ ID NO:33所示。

12.根据权利要求10所述的嵌合抗原受体，其中，所述CD28胞内信号区和CD3ζ胞内信号区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:34和SEQ ID NO:33所示。