[发明专利]一种应用生物炭促进生物还原硝基苯的方法

权利要求书

1.一种应用生物炭促进生物还原硝基苯的方法，其特征在于包括如下步骤：

(A)微生物的培养：采用异化金属还原菌作为还原硝基苯的微生物；

(B)配制50mL的20mM磷酸盐缓冲溶液，加入50mM乳酸钠，并转移至50mL的玻璃厌氧瓶中，并用0.1mol/L的NaOH或HCl溶液调节pH至7.0，然后通氮气曝气将厌氧瓶顶空及水溶液中的氧气排尽，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌，冷却后转移至厌氧箱中以确保厌氧状态；

(C)在厌氧箱中，用移液枪吸取硝基苯转移至厌氧瓶中，得到50mL浓度为5-400mg/L的硝基苯溶液；

(D)称取生物炭并在厌氧箱中转移到厌氧瓶中，浓度为0.167-0.667g/L，超声1h使其均匀分散在溶液中；

(E)收集培养至对数期末期的微生物细胞，并转移至厌氧瓶中，使菌浓度为0.5g/L，然后将厌氧瓶放入150rpm，30℃恒温摇床中，避光反应1-10d。

2.根据权利要求1所述的一种应用生物炭促进生物还原硝基苯的方法，其特征在于：

所述的步骤(A)中，用来还原硝基苯的异化金属还原菌为ShewanellaoneidensisMR-1；

所述的步骤(B)中，通氮气曝气时间为30min；高压蒸汽灭菌条件为121℃，20min；

所述的步骤(C)中，硝基苯加入溶液后，超声1h使硝基苯均匀分散在溶液中。

3.根据权利要求1所述的一种应用生物炭促进生物还原硝基苯的方法，其特征在于，所述的步骤(D)中用来促进微生物还原硝基苯的生物炭包括使用自然焚烧法和限氧热解法两种方式制备的生物炭：自然焚烧法为，将生物质置于室外空气中充分燃烧，收集燃尽的炭化产物；限氧热解法为，将生物质材料置于管式热解炉中，以5℃/min的升温速率加热至300-800℃，恒定温度热解2h，热解过程中持续通氮气，保证炉内厌氧环境，并将气态有机产物吹扫出热解炉，自然冷却后取出炭化产物；分别将自然焚烧和限氧热解后的炭化产物用去离子水洗3-5次，于真空干燥箱40℃干燥24h，研磨，过100目筛，即分别得到自然焚烧和限氧热解生物炭。