[发明专利]一种红豆杉枝叶中10-去乙酰基巴卡亭III的检测方法

权利要求书

1.一种红豆杉枝叶中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备供试品溶液：将红豆杉枝叶用有机溶剂浸泡超声，过滤，得到供试品溶液；

(2)制备对照品溶液：用有机溶剂配制10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ对照品，过滤，得到对照品溶液；

(3)检测方法：用高效液相色谱对步骤(1)得到的供试品和步骤(2)得到的对照品进行检测。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)所述的有机溶剂为甲醇；

优选地，所述甲醇与红豆杉枝叶的体积质量比为(5-12)：1，优选为(6-10)：1，进一步优选为8：1；

优选地，所述浸泡超声的时间为80-160min，优选为100-150min，进一步优选为120min。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述的有机溶剂为甲醇和醋酸的混合液；

优选地，所述甲醇和醋酸的体积比为(150-300)：1，优选为(180-240)：1，进一步优选为200：1。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述的对照品的浓度为0.05-0.5mg/mL，优选为0.1-0.3mg/mL，进一步优选为0.2mg/mL。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述的高效液相色谱中的色谱柱为ShimpackC18分析柱；

优选地，所述分析柱的规格为250mm×4.60mm，5.0μm。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述的高效液相色谱检测时的进样量为10-20μL，优选为15-20μL，进一步优选为20μL。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述的高效液相色谱检测时的流动相为水、甲醇和乙腈的混合溶液；

优选地，所述混合溶液中水、甲醇和乙腈的体积比为(20-35)：(5-20)：(3-12)，优选为(25-30)：(10-18)：(5-10)，进一步优选为29：13：8。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述的高效液相色谱检测时的流动相的流速为0.9-1.1mL/min，优选为1mL/min；

优选地，所述高效液相色谱检测时的洗脱方式为等浓度洗脱。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述的高效液相色谱检测时的检测波长为200-250nm，优选为210-230nm，进一步优选为228nm；

优选地，所述的高效液相色谱检测时的柱温为25-35℃，优选为28-32℃，进一步优选为30℃。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)制备供试品溶液：将红豆杉枝叶用甲醇浸泡，甲醇与红豆杉枝叶的体积质量比为(5-12)：1，超声80-160min，0.45μm的滤膜过滤，得到供试品溶液；

(2)制备对照品溶液：用体积比为(150-300)：1的甲醇和醋酸混合液配制10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ对照品，配制的浓度为0.05-0.5mg/mL，0.45μm的滤膜过滤，得到对照品溶液；

(3)检测方法：用高效液相色谱对步骤(1)得到的供试品和步骤(2)得到的对照品进行检测，采用色谱柱为ShimpackC18分析柱，规格为250mm×4.60mm，5.0μm；

其中，检测条件为进样量为10-20μL，采用流动相为水、甲醇和乙腈的混合溶液，水、甲醇和乙腈的体积比为(20-35)：(5-20)：(3-12)，流动相的流速为0.9-1.1mL/min，检测波长为200-250nm，柱温为25-35℃。