[发明专利]一种荔枝霜疫霉菌LAMP引物及其快速检测方法有效
| 申请号： | 201510820807.4 | 申请日： | 2015-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN105331714B | 公开（公告）日： | 2018-11-09 |
| 发明（设计）人： | 李本金;陈庆河;刘裴清;刘小丽;翁启勇 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 福建省福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 荔枝 霉菌 lamp 引物 及其 快速 检测 方法 | ||
1.一种用于检测荔枝霜疫霉菌的LAMP引物，其特征在于：所述LAMP引物如下：
外侧引物 ：
F3：5’-CCGTACGATCGAGCTGGA-3’ ；
B3：5’-CCGTCACGTCGTACACCA-3’；
内侧引物：
FIP：5’-TCGACTCAAGGTTACAGAACGCTGCAAGACCATCAAGCTCCA-3’；
BIP：5’-GTGCTTTTATAGTGGGACACCGCCGCGGTAGTAGCTGCTAGT-3’。
2.一种荔枝霜疫霉菌的LAMP检测方法，其特征在于：利用权利要求1中所述的LAMP引物进行检测；LAMP反应体系为25 µL：包括F3与B3各0.2µM， FIP与BIP各1.6µM，1×ThermopolBuffer，1.0 mM dNTPs，0.8 M甜菜碱，6.0 mM硫酸镁，0.1% Tween-20，8 U
3.根据权利要求2所述的荔枝霜疫霉菌的LAMP检测方法，其特征在于：在LAMP反应体系中，以50μM Calcein-500μM MnCl2为显色剂，显色结果观察到绿色荧光判断为阳性，橘黄色判断为阴性；或取2uL扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测，如出现梯形条带判断为阳性，没有出现则判断为阴性。
4.如权利要求1所述的用于检测荔枝霜疫霉菌的LAMP引物在田间荔枝霜疫霉病的早期诊断、病菌的监测和鉴定中的应用。
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