[发明专利]食品和餐饮具中单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片，所述试纸片中含有混合培养基，其特征在于：所述混合培养基由基础培养基、显色剂和冷水凝胶组成，所述显色剂的名称为(2R,3S,4R,5R,6R)-1，2，3，4，5-五羟基环己基-(2-硝基-4-氟苯基)磷酸酯，分子量为398，所述显色剂的结构式如式一所示：

2.根据权利要求1所述的单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片，其特征在于：所述的显色剂(2R,3S,4R,5R,6R)-1，2，3，4，5-五羟基环己基-(2-硝基-4-氟苯基)磷酸酯采用如下方法制备而成，包括如下步骤：

(1)将反应物A溶于无水二异丙胺及少量无水氯仿中，得到反应物A体系，然后将所述反应物A体系置于-70～-80℃条件下冷冻；

(2)在低温-70～-80℃低温条件下，将反应物B在无水、氮气氛围中逐滴加入到反应物A体系中，剧烈搅拌，反应5.5～6.5h；

(3)将步骤(2)反应后的体系置于室温环境中，待反应体系达到室温后，继续向体系中加入溶有反应物C的无水氯仿溶液，室温继续搅拌反应12～14h，生成亚磷酸酯类物质；

(4)在步骤(3)反应后的体系中加入叔丁基过氧化氢，将亚磷酸盐氧化，并将得到的磷酸盐置于三甲胺中，在50±0.5℃条件下放置22～24h；

(5)除去三甲胺，得到粗产物后，再加入乙硫醇和三氟化硼-醚溶液进行去保护反应，最终得到的目标产物即为所述显色剂，其中，所述反应物A为1，2，3，4，5，6-六甲氧基亚甲基-肌醇，反应物B为二氯亚磷酸甲酯，反应物C为2-硝基-4-氟苯酚。

3.根据权利要求2所述的单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片，其特征在于：所述反应物A、反应物B、反应物C的用量摩尔比为1:1.25:2。

4.根据权利要求2所述的单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片，其特征在于：步骤(1)中所述反应物A与无水二异丙胺的用量摩尔比为1:2.5。

5.根据权利要求1～4任一项所述的单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片，其特征在于：所述基础培养基由胰蛋白胨、牛肉粉、多价胨、氯化纳、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、甘氨酸、氯化锂、苯乙醇、七叶苷组成；所述冷水凝胶由聚丙烯酸钠、黄原胶和海藻糖组成。

6.根据权利要求5所述的单增李斯特菌快速检测冷水凝胶试纸片，其特征在于：每升所述混合培养基中含有胰蛋白胨5.0～6.0g、牛肉粉5.0～6.0g、多价胨3.0～5.0g、氯化纳8.0～10.0g、磷酸二氢钾1.0～1.5g、磷酸氢二钠5.0～7.0g、甘氨酸8.0～10.0g、氯化锂1.0～2.0g、苯乙醇2.0～3.0g、七叶苷1.0～1.5g；显色剂(2R,3S,4R,5R,6R)-1，2，3，4，5-五羟基环己基-(2-硝基-4-氟苯基)磷酸酯2.0～2.5g；聚丙烯酸钠4.0～6.0g、黄原胶1.0～3.0g、海藻糖2.0～4.0g。