[发明专利]微小植物种子及花粉的消毒与接种方法

说明书

技术领域

本发明属于农业接种技术领域，尤其涉及一种微小植物种子及花粉的消毒与接种方法。

背景技术

兰科(Orchidaceae)植物是被子植物的一个大类群，许多兰科植物在观赏与药用方面都具有较高的价值。但由于大量掠夺式的采挖，造成其生境的破坏而使野生的兰科植物资源种群急剧下降。兰科植物的种子及其微小，无胚乳，自然状态下很难萌芽成苗。但是许多兰科植物又同时是高端药用植物，如：白芨、石斛、天麻等在中药材中都具有不可替代的药效。

白芨属(Bletillasfriata(Thunb.)Reiehb.f.)为陆生型兰科植物，其主要药用部分为干燥的白芨块茎，主含白芨胶，其含量高达50％。首先，白芨胶对皮肤无毒无刺激作用，是绿色安全产品；其次，白芨胶具有止血补肺、生肌止痛等功效，用于治疗内外伤出血，疮疡肿毒，促进皮肤修复具有奇效，是云南白药、葵花胃康灵、创口贴等药物的主要原料；再者，白芨胶还具有清除体内自由基、延缓皮肤衰老的功效，在化妆品行业具有广泛用途；最后，白芨胶具有很高的粘稠特性，可做为增稠剂、悬浮剂、助乳化剂等作用，在食品行业具有广泛的用途。全国每年需求白芨干品约2000-3000吨，而每年现实供应量仅有300吨左右，缺口巨大，导致白芨价格年年攀升，现在白芨干品接近800元/kg。

石斛属(Dendrobium)是兰科第二大属，许多种类为我国传统名贵中药材。在《神农本草经》中，“石斛”被列为上品，具有益胃生津、滋阴清热、明目利嗓等作用。在民间，石斛为兰科石斛属多种植物的总称。其中，铁皮石斛(D.officinale)由于极高的药用和保健价值，2010年版《中国药典》将其单独收录。此外，金钗石斛(D.nobile)、马鞭石斛(D.chryanthum)、霍山石斛(D.huoshanense)及其近似种的新鲜或干燥茎均列于“石斛”项下。

目前大规模培养兰科植物主要是通过三种途径获取种苗。第一种也是最原始的一种方法，就是通过采挖野生的兰科植物块茎来获得种球茎，然后进行人工训化栽培，这种方法也使得现在的兰科植物的野生存货量大大减少，甚至于有不少的兰科植物现在已被列为国家濒危植物，如白芨、石斛均被列为国家二级濒危植物。

第二种方法即为组织培养技术，也是目前市场上主流的兰科植物等微小种子的人工培养技术。由于兰科植物种子大多包含在一个果荚内，一般一个长为3cm、直径为0.8cm的果荚就包含上万颗种子，因为该种子只含有胚和种皮，在自然条件下很难萌发。但是组织培养技术又需要在接种前对兰科植物的微小种子进行消毒处理，其消毒和接种过程相对比较复杂，而且传统的消毒方法在接种后污染率高，过程复杂。

第三种方法大多是适用于萌发相对比较容易的微小种子，在生产过程中直接将种子在土壤上直播，但对于兰科植物种子的直播条件，要求相当苛刻，首先需要共生菌接种，其次，需要合适的温度、湿度和pH值。另外，直播苗的重大缺陷在于萌芽率低于5％，且萌芽所需时间长，约需3-4个月才能萌芽分化出芽，长成5-10cm的苗需要1年半时间。这就要求我们研究出一种相对比较容易的微小种子的消毒和接种方法。

在目前农作物的单倍体或者多倍体育种上，大多通过植物花药中的花粉粒诱导。而花粉的无菌操作和面临着和兰科植物相同的难题，此发明就为这一难题提供了一种现实可行的解决办法。

发明内容

为了达到上述目的，本发明提供了一种污染率低、种苗培育效率高的微小植物种子及花粉的消毒与接种方法。

本发明提供了一种微小植物种子及花粉的消毒与接种方法，其包括以下步骤：

步骤A，提供颗粒粒径为10-30μm的植物种子或花粉，加入体积浓度为70-80％的乙醇溶液，轻轻摇晃容器至种子或花粉完全与消毒剂接触，30s-1min后，采用直径为2-5mm针头的灭菌的注射器将乙醇溶液吸出，只留下种子或花粉；

步骤B，加入体积浓度为2-4％的次氯酸钠溶液，8-10min后，换用新的直径为2-5mm针头的灭菌注射器将次氯酸钠溶液吸出，只留下种子或花粉；

步骤C，重复步骤B2次；

步骤D，加入无菌水，1-3min后，换用新的直径为2-5mm针头的灭菌注射器将次氯酸钠溶液吸出，只留下种子或花粉；

步骤E，重复步骤D3-5次；

步骤F，将步骤E得到的种子或花粉进行接种。