[发明专利]一种高速逆流色谱提取油茶中抑菌物质的方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及高速逆流色谱分离纯化领域，具体涉及一种高速逆流色谱提取油茶中抑菌物质的方法及应用，还涉及一种油茶提取物。

背景技术

目前，对植物源中活性成分的提取大部分采用水提法、水蒸气蒸馏法、有机溶剂法、超滤膜法等，这些方法不同程度地存在得率低、提取时间长、流程多、能耗大、纯度低等缺点。

而高速逆流色谱是一种新型的液—液分配色谱技术，可以在较短的时间内实现样品在两个互不相溶的溶剂系统中的高效分配，从而实现样品高度分离。HSCCC最大的优点是每次分离样品的进样量比较大，可以达到毫克量级，甚至克量级；同时，HSCCC是一种不使用固态支撑体或载体的液液分配色谱技术。它不需要任何固态载体，只是借助螺旋管的同轴行星式运动实现固定相的高保留以充分分配分离，避免了分离样品与固态载体表面发生化学反应而变性和不可逆吸附等情况。每次分离样品结束后，管道中残留溶剂均可冲出，不会对后续分离产生任何影响，因此分离样品均具有高回收率。

目前，应用HSCCC方法分离制备油茶中最强抑菌活性物质的研究还尚未见报道。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种高速逆流色谱提取油茶中抑菌物质的方法及应用、油茶提取物。

第一方面，本发明提供了一种高速逆流色谱提取油茶中抑菌物质的方法，包括以下步骤：

(1)油茶粗提物的制备：连续相变萃取茶粉原料，获得油茶粗提物；

(2)高速逆流色谱法分离：采用含1-10％乙酸的乙酸乙酯、正丁醇、水混合液作为两相溶剂体系，在流速1.0～3.0mL/min，主机转速500～900r/min，进样量100mg～600mg的条件下，将步骤(1)制得的油茶粗提物进行高速逆流色谱法分离，并根据峰形分段收集流出液，获得油茶中的抑菌物质；其中，所述含1-10％乙酸的乙酸乙酯、正丁醇、水混合液中，乙酸乙酯、正丁醇、水的体积比为1：2～4：4。

优选的，步骤(1)中所述的茶粉原料通过将油茶的茶叶或茶梗、根、花、籽粕粉碎制得。

进一步优选的，将油茶的茶叶或茶梗、根、花、籽粕粉碎至20-80目，得到茶粉原料。

优选的，步骤(1)所述的连续相变萃取茶粉原料，获得油茶粗提物的步骤包括：将茶粉原料装入萃取釜中，在始终低于萃取剂的临界压力和临界温度的条件下，将萃取剂压缩为液体，在萃取温度50-90℃，萃取压力0.3-0.7MPa的条件下，流经萃取釜，连续萃取1-5h，所得萃取物流经解析釜，获得油茶粗提物。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂包括但不限于乙醇、甲醇、丙酮、石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷，丙烷、丁烷中的一种或多种。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂的浓度为50-90％。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为70-90％的乙醇水溶液，萃取温度优选为70-90℃，萃取压力优选为0.4-0.6MPa，连续萃取1-3h。

优选的，所述步骤(1)中，所述流经萃取釜的流速为80-150L/h。

优选的，所述步骤(1)中，所述流经解析釜中解析并收集萃取物的条件为：解析温度为80-90℃，解析压力为0.05-0.2MPa。

进一步优选的，所述步骤(1)中，解析温度为90℃，解析压力为0.2MPa。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为70％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度70℃，萃取压力0.4MPa，连续萃取1h。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为70％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度80℃，萃取压力0.5MPa，连续萃取2h。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为70％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度90℃，萃取压力0.6MPa，连续萃取3h。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为80％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度90℃，萃取压力0.5MPa，连续萃取1h。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为80％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度70℃，萃取压力0.6MPa，连续萃取2h。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为80％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度80℃，萃取压力0.4MPa，连续萃取3h。

优选的，所述步骤(1)中，所述萃取剂为90％的乙醇水溶液，萃取条件为：萃取温度80℃，萃取压力0.6MPa，连续萃取1h。