[发明专利]一种脾多肽注射液的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体地说，涉及一种脾多肽注射液的制备方法。

背景技术

众所周知，哺乳动物体内有不少人体所需的各种营养成分及活性成分，进而有不少针对从哺乳动物的心脏、肝脏及肌肉组织中提取活性多肽的报道。

而脾脏是哺乳动物的外周免疫器官，也是动物体内代谢最为旺盛的器官之一，由于其中含有丰富的细胞基本营养成分及细胞因子，特别是促进细胞代谢的活性成分如多肽类物质和核酸以及免疫调节因子——寡核苷肽等，因而受到研究者的广泛关注。国外对脾提取物的研究工作较早，目前已有用于化妆品的商品，如crydermine及增强免疫功能的保健品，如spleenP.M.G、IM-Encap、Gold-speen500等。

《肉类工艺》2002年2期的“猪脾多肽的制备工艺研究”公开了猪脾脏的制备工艺，工艺流程为脾脏——去脂肪——匀浆——脱脂——酶解——终止反应——过滤——吸附脱色——凝胶层析——真空干燥——成品。具体工艺为：取一定量的新鲜猪脾脏，取掉大块的外表脂肪、表皮及皮下筋膜，加1：1的10℃蒸馏水，用组织捣碎机匀浆，按4:1的比例加正己烷或乙醚在常温下密闭抽提2h脱脂，分离得到脱脂的脾脏匀浆；将400ml脾匀浆液，置于恒温水浴锅中，调节温度至(50±2)℃，以Ca(OH)₂乳液调节溶液至酶最适pH值，加入30g酶，反应一段时间后，以1:1HCl调pH至中性，同时升温至80℃保持15min，使酶钝化中止反应，纱布过滤，滤液加5％的活性炭吸附脱色，抽滤，过G-15葡聚糖凝胶柱，收集范围的溶液，50℃真空浓缩干燥，得脾脏多肽成品。该工艺采用的是酶解法，通过酶解脾脏中蛋白质来获得多肽，所得多肽成分组成易变动且并非原来天然存在的多肽。

CN1634987A公开了一种从除人以外的哺乳动物脾脏组织中提取制备的脾多肽提取物，将哺乳动物组织经去脂肪、匀浆、调酸、冻融破碎、调节pH值沉淀、加热、离心过滤、超滤等步骤制得脾多肽提取物；该药为免疫调节药，能够提高和改善机体免疫功能，可用于原发性和继发性细胞免疫缺陷病(如湿疹、血小板减少、多次感染综合症等)、呼吸道及肺部感染、习惯性感冒、慢性乙型肝炎、流行性腮腺炎、复发性口疮等疾病治疗，可在治疗放化疗引起的白细胞减少症、白血病、再生性障碍贫血、淋巴瘤及其他恶性肿瘤、改善肿瘤患者恶变质、改善术后或重症患者身体虚弱时辅助使用。

然而，采用现有技术的方法提取率低，使得脾多肽提取物中多肽的含量低，从而影响其制剂的疗效。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脾多肽注射液的制备方法，该方法脾多肽提取率高，得到的提取物中多肽的含量高，疗效好。

为实现本发明的目的，本发明采用如下方案：

一种脾多肽注射液的制备方法，该方法包括如下步骤：

1)取新鲜健康干净的除人以外的哺乳动物的脾脏，加水匀浆，得匀浆液；

2)将匀浆液进行超声提取，得提取液；

3)提取液调节pH值至3.8～4.2，反复冻融2～3次；最后一次融化后的提取液离心，取上清液过滤，得清液I；

4)向清液I中加入95％乙醇，搅拌，使清液I中乙醇含量在75～85％，0～10℃静置12～24小时，滤取上清液，得清液II；

5)清液II调节pH值至6.5～7.0，加热，冷却至常温后离心，取上清液过滤，得清液III；

6)清液III冷冻，冻实后融化，过滤，清液超滤1～2次，所得超滤液即为脾多肽提取物；

7)上述脾多肽提取物过滤至配置罐中，补加注射用水定容，并调节pH值至6.5～7.0，经终端过滤后灌装，灭菌，包装，即得所述的脾多肽注射液。

CN1634987A公开了一种从除人以外的哺乳动物脾脏组织中提取制备的脾多肽提取物及制备方法，然而该方法的提取率低，使得脾多肽提取物中多肽的含量低，从而影响其制剂的疗效。

本发明对脾多肽的提取方法进行了改进，试验表明，采用本发明方法脾多肽的提取率高，得到的脾多肽提取物中多肽的含量高，其临床疗效好。

其中，步骤1)中，加水的量为脾脏重量的6～10倍，优选8倍。

即加水的质量与脾脏重量的比为6:1～10:1，优选8:1。