[发明专利]一种葱白多糖提取纯化方法

权利要求书

1.一种葱白多糖提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将干燥的香葱葱白进行粉碎并过筛，得到香葱葱白粉末；

（2）取香葱葱白粉末，将香葱葱白粉末与无菌水以1:5-1:8比例混合，加热煮沸2-3小时，并辅以超声波辅助提取，至少离心10-15分钟，取上清液；离心后的残渣按上述方法再提取至少3-4次，上清液合并，得多糖提取液；

（3）采用旋转蒸发仪在60-80℃下将多糖提取液浓缩至原体积的1/4~1/7，得多糖浓缩液；

（4）以4-25℃食用酒精沉淀多糖浓缩液，使酒精含量达到总体积65-80%，多糖以沉淀形式析出，水、部分杂质和色素溶解在酒精相中，至少离心10-15分钟，取沉淀相，再用酒精溶解，重复醇沉至少2-3次；

（5）将醇沉粗多糖充分溶于蒸馏水中，用Na2CO3稀溶液调该粗多糖溶液的pH值为4.5-7.6，加入胰蛋白酶，甲苯体积1-2%，35-37℃恒温水解一定时间，旋转蒸发浓缩；

（6）将蛋白酶解后的浓缩液加入占体积1/3的Sevag试剂，抽提1-3小时，离心10-15分钟，取上清液；上清液继续用1/3体积的Sevag试剂进行脱蛋白，重复至少2-3次；

（7）将脱蛋白多糖液浓缩至原体积1/3-1/4，4-25℃醇沉24h以上，至少离心10?15min，弃上淸液并室温挥发干乙醇，得到多糖；

（8）用多糖质量5-15倍的蒸馏水进行溶解，利用超滤膜将葱白多糖提取液进行超滤，收集分子量10000道尔顿以上的组分，再进行葡聚糖凝胶SephadexG-100于25度以下进行柱层析得纯化多糖，收集多糖组分，冷冻干燥，得到葱白多糖。

2.根据权利要求1所述提取纯化方法，其特征在于：步骤（2）、步骤（4）和步骤（6）所述离心提取的速度为8000?10000转/分钟。

3.根据权利要求1所述提取纯化方法，其特征在于：步骤（1）所述过筛是过80-120目筛。

4.根据权利要求1或2所述提取纯化方法，其特征在于：步骤（6）所述Sevag试剂为体积比为4:1的氯仿和正丁醇配制成的混合液。

5.根据权利要求1所述提取纯化方法，其特征在于：步骤（5）所述粗多糖溶液的pH值调节至7.5，所述胰蛋白酶的活性为8000-10000U/g。

6.根据权利要求1所述提取纯化方法，其特征在于：步骤（7）所述乙醇是浓度为体积百分比90-98%的乙醇。

7.根据权利要求6所述提取纯化方法，其特征在于：步骤（7）所述乙醇是浓度为体积百分比95%的乙醇。