[发明专利]一种蛇毒纤溶酶的制备方法在审
申请号: | 201510826560.7 | 申请日: | 2015-11-25 |
公开(公告)号: | CN105385671A | 公开(公告)日: | 2016-03-09 |
发明(设计)人: | 刘乃山;于晓娜;刘翠珍 | 申请(专利权)人: | 青岛康原药业有限公司 |
主分类号: | C12N9/68 | 分类号: | C12N9/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266300 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛇毒 纤溶酶 制备 方法 | ||
1.一种从蛇毒中提取蛇毒纤溶酶的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)蛇毒干粉用含NaCl的磷酸缓冲液溶解后,离心去沉淀,得上清液;
(2)离子交换层析:将上述上清液,上样于DEAE-SepharoseFastFlow柱,用含NaCl的磷酸平衡液冲洗,换用含不同浓度NaCl的磷酸洗脱液洗脱;紫外检测,收集酶活性部分,超滤浓缩;
(3)凝胶过滤层析:将上述浓缩液上样于SepharcylS-200凝胶柱,用含NaCl的磷酸缓冲液平衡,紫外检测仪检测并记录,洗脱酶活性峰,超滤后冷冻干燥,即得成品。
2.根据权利要求1所述的从蛇毒中提取蛇毒纤溶酶的方法,其特征在于所述步骤(1)中所述的缓冲液是pH7.0~9.0的含0.01~0.20mol/LNaCl的0.01~0.05mol/L磷酸缓冲液。
3.根据权利要求1所述的从蛇毒中提取蛇毒纤溶酶的方法,其特征在于所述步骤(2)中所述平衡液是pH7.0~9.0含0.01~0.20mol/LNaCl的0.01~0.05mol/L磷酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的从蛇毒中提取蛇毒纤溶酶的方法,其特征在于所述步骤(2)中所述洗脱液用pH7.0~9.0含0.1~0.5mol/LNaCl的0.01~0.05mol/L磷酸缓冲液。
5.根据权利要求1所述的从蛇毒中提取蛇毒纤溶酶的方法,其特征在于所述步骤(4)中所述平衡液是pH7.0~9.0含0.01~0.20mol/LNaCl的0.01~0.05mol/L磷酸缓冲液。
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