[发明专利]脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料的制备方法。

背景技术

目前，眼角膜病变是多发病、常见病，尤其是外伤、感染局部组织病变、晶体病变会导致眼角膜边缘改变，最终改变角膜组织的透明度导致失明。角膜病变导致的失明，目前唯一施行的治疗手段是异体角膜移植，由于捐献材料来源匮乏，大量角膜移植病例的病人因等待角膜移植而处于失明状态。根据2011年眼科流行病学调查报告显示：我国因角膜病变导致失明的病人约为十万分之七点一每年,即每年增长约十万例。目前我国每年可用于移植的异体角膜材料不足一万只，累计等待角膜修复治疗的病人数量在二百万例左右，如果计入因部分角膜病变或边缘角膜病变需要角膜材料或者眼表组织修复材料的病人这个数量将达到上千万。

目前，国内外都在进行大量的角膜替代产品研究，角膜替代产品材料主要集中在异体羊膜、海洋生物胶原蛋白与异种角膜材料方面，上述材料由于材料自身特性的限制都很难达到永久性或复明性的效果。

由此可见，国内外对角膜替代品以及眼表组织修复材料的需求量大，现有的产品不具有永久性或复明性的效果，亟待进一步开发新的生物组织工程学的角膜修复材料。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料的制备方法，该制备方法其拓宽了制备角膜以及眼表组织修复材料的原料来源，降低了生产角膜或眼表组织修复材料的成本，制备的脱细胞真皮基质角膜可广泛应用于感染、外伤或组织病变导致角膜损伤的眼角膜再生性修复。

为解决上述技术问题本发明一种脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料的制备方法，其包括以下步骤：

步骤A：选取哺乳动物体或人体的真皮组织；

步骤B：通过对比所述真皮组织与角膜组织的结构，确定所述真皮组织结构中与所述角膜组织结构相近且相邻5层的真皮组织β层结构；

步骤C：去除所述真皮组织中除真皮组织β层结构以外的其他层，获得真皮组织β层初级原料；

步骤D：对所述真皮组织β层初级原料进行脱细胞处理，获得脱细胞真皮组织β层初级原料；

步骤E：将经步骤D处理的脱细胞真皮组织β层初级原料在无菌、恒温条件下，于平衡原液中混摇一定时间，复原所述脱细胞真皮组织β层初级原料中胶原蛋白、活性因子的生物性能；

步骤F:将经步骤E中处理后的脱细胞真皮组织β层初级原料，在平衡液中处理，通过改变蛋白质膜的通透性和补充平衡离子的方式，封闭真皮组织β层初级原料的电位点，得到脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料。

本发明的一个实施例中，所述步骤F中，通过组合离子或者单一离子来调平所述脱细胞后的真皮组织β层初级原料的电位差，达到封闭所述脱细胞后的真皮组织β层初级原料中蛋白质的电位点的目的。

本发明的一个实施例中，所述步骤C中，去除真皮组织结构中除真皮组织β层结构以外的其他层的过程中，保留神经生长因子和巢蛋白-内功素，以利于建立细胞的非血管营养模式。

本发明的一个实施例中，所述步骤D中，移除所述真皮组织β层初级原料中具有免疫原性的表皮细胞以及其他成体细胞，保留具有天然组织立体框架的胶原蛋白和弹力纤维，并维持真皮组织β层初级原料的脱细胞前结构。

本发明的一个实施例中，所述步骤C中，利用固定液对所述真皮组织β层初级原料进行固定。

本发明的一个实施例中，所述步骤E中，所述恒温条件中，温度选择范围为16~37摄氏度。

本发明的一个实施例中，所述步骤E中，于平衡液中混摇的时间为4~24小时。

本发明的一个实施例中，所制备的脱细胞真皮基质角膜或眼表组织修复材料直接用于人或动物的移植。

本发明脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料的制备方法具有以下有益效果：

本发明提供脱细胞真皮基质角膜及眼表组织修复材料的制备方法中，选取动物或者人体的真皮作为原料来源，拓展了原料的来源途径，降低了制备角膜替代材料的成本，且本发明的制备方法简单，制造成本低，该脱细胞真皮基质角膜和眼表组织修复材料可广泛应用于感染、外伤或组织病变导致角膜损伤的眼角膜再生性修复中。

下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

附图说明

图1为本发明的脱细胞真皮基质角膜材料植入实验兔随着时间变化生长情况的显微镜照片图；

图2为本发明制备的脱细胞真皮基质角膜材料植入动物体后12小时的组织学切片照片图；