[发明专利]NY-ESO-1有作为增强Artv1(wtArt)过敏原免疫反应分子佐剂的作用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别是涉及NY-ESO-1有作为增强Art v1(wtArt)过敏原免疫反应分子佐剂的作用。

背景技术

据推断，最开始对于肿瘤特异性抗原（TAA）的自身免疫应答反应可能有先天性免疫系统受体的参与。坏死肿瘤细胞会释放内源性因子或是例如热休克蛋白，高迁移率族蛋白B1（HMGB-1），尿酸这样的损伤相关模式分子。这些损伤模式分子分别通过CD91，晚期糖基化终末产物受体，TLR2/TLR4，以及白介素-1（IL-1）受体向先天免疫系统发出警报。TAA本身通常被认为是上述“危险信号”的旁观者，担任抗肿瘤免疫应答反应起始阶段的佐剂。根据这个例子可以说明，自发的免疫反应是由于存在于癌细胞中11000个基因突变而产生的新肽所引起的。然而，迄今为止，所发现的人类的TAA通常是非突变的自身蛋白。我们因此推断，来自于一些已知的TAA的内在因子也可能在体内最初阶段的抗肿瘤免疫应答反应中发挥着作用。

在寻找那些宿主和肿瘤中有助于促成抗肿瘤的免疫反应的内在因子的过程中，我们将关注点放在了NY-ESO-1身上。NY-ESO-1是一种具有超强免疫原性的非突变肿瘤睾丸抗原。针对于NY-ESO-1的自发性抗体以及T细胞免疫反应能够在患有NY-ESO-1表达的肿瘤病人身上常常检测的到，这些病人包括那些免疫能力低的癌症晚期的老年患者。此外，自发性NY-ESO-1抗原在黑色素瘤中的减少，表明了抗NY-ESO-1的免疫反应可能会影响肿瘤的自然史。与其他TAA相比，NY-ESO-1的免疫原性不是由于其更高的表达水平。事实上，至少在黑色素肿瘤中的NY-ESO-1的表达水平要显著低于黑色素细胞分化抗原，如gp100，MART-1，TRP-1和TRP-2，，以及其他的肿瘤/睾丸抗原，如基于新鲜肿瘤样本实时定量PCR分析的MAGE-1和MAGE-3。

我们最近研究了NY-ESO-1与在不成熟的树突细胞，巨噬细胞，单核细胞表面上补体Cq1受体（在文献中被视为等同于钙网织蛋白）间特殊的联系，从而说明了NY-ESO-1与先天性免疫系统之间的特异性相互作用。在这篇文章中，说明了NY-ESO-1的免疫原性，与它自身的聚合结构以及小鼠体内中的TLR4有关。

发明内容

据推断，最开始对于肿瘤特异性抗原（TAA）的自身免疫应答反应可能有先天性免疫系统受体的参与。坏死肿瘤细胞会释放内源性因子或是例如热休克蛋白，高迁移率族蛋白B1（HMGB-1），尿酸这样的损伤相关模式分子。这些损伤模式分子分别通过CD91，晚期糖基化终末产物受体，TLR2/TLR4，以及白介素-1（IL-1）受体向先天免疫系统发出警报。TAA本身通常被认为是上述“危险信号”的旁观者，担任抗肿瘤免疫应答反应起始阶段的佐剂。在寻找那些宿主和肿瘤中有助于促成抗肿瘤的免疫反应的内在因子的过程中，我们将关注点放在了NY-ESO-1身上。NY-ESO-1是一种具有超强免疫原性的非突变肿瘤睾丸抗原。针对于NY-ESO-1的自发性抗体以及T细胞免疫反应能够在患有NY-ESO-1表达的肿瘤病人身上常常检测的到，这些病人包括那些免疫能力低的癌症晚期的老年患者。但NY-ESO-1作为免疫分子佐剂的作用未清楚。

鉴于以上所述现有技术，本发明第一方面提供NY-ESO-1蛋白甚至在存在有常规浓度的β-巯基乙醇的loading buffer中也能形成多聚结构。

相关数据显示，从细菌及哺乳动物细胞中获得的NY-ESO-1蛋白甚至在存在有常规浓度的β-巯基乙醇的loading buffer中也能形成多聚结构（图1A,B）。

本发明第二方面提供NY-ESO-1的聚合反应由其分子间的二硫键介导。

相关实验显示，NY-ESO-1野生型蛋白清楚的显示出了存在二聚体，四聚体甚至130 kDa的多聚体的形式。ESOcs1、ESOcs2显示出的主要为单体及二聚体结构形式，而ESOcs3的结果显示出主要为单体。说明NY-ESO-1的聚合反应是由于其分子间的二硫键造成的。

本发明第三方面提供NY-ESO-1在体外与人的及鼠的未成熟的树突细胞结合与其自身的聚合结构有关。