[发明专利]一种植物叶片DNA高通量快速提取磨样器的应用

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种植物叶片DNA高通量快速提取磨样器的应用，属于生物技术领域。

二、背景技术

随着基因组计划的飞速发展，许多植物的基因组不断测序完成，如水稻、玉米、普通小麦、西瓜、番茄、马铃薯等。随着基因组测序的完成，科学家们更加广泛、深入的开展了重要基因的定位、克隆和功能研究。而基因定位需要大量的从植物中提取DNA，进行PCR扩增。传统的DNA提取方法是借助于研钵研磨或磨样机将植物样品研磨成粉末，然后再用DNA提取试剂(如SDS、CTAB和TPS等)或DNA提取试剂盒提取。传统方法的优点是：可以提取高质量、高浓度的DNA。但亦有明显的缺点，那就是样品仅能单个提取、步骤繁多、提取过程需要设计数小时。在基因定位特别是精细定位过程中，针对一个基因的定位就需要提取几千乃至上万个DNA样品。传统的DNA提取需要花费数天甚至数周来提取DNA。然而这些样品在定位过程中，特别是精细定位过程中，仅需要用到一次或少数几次，就被丢弃。

鉴于此，有些科学家发明了DNA快速提取方法，许多公司更是开发了DNA快速提取试剂盒或者是直接PCR提取试剂盒。这些快速方法的共同特点是：用剪刀将样品剪碎放入200μL的96孔PCR板中，置于PCR仪中加热5～10分钟即可完成DNA提取，极大的节约了DNA提取时间。

然而，将样品装到96孔板中的过程中，要用剪刀将每个样品分别剪碎、装入96孔PCR板的各个加样孔中，非常耗时、费工。将植物样品直接放置的96孔PCR板中，不需要用剪刀逐个剪碎，采用一种高通量的96孔磨样器将96个样品一次性全部磨碎，可以简化工作程序，节省大量时间和人力，是一个急需改进的技术问题。

三、发明内容

技术问题

本发明目的为了解决DNA快速提取方法或DNA直接PCR过程中，植物样品需要先用剪刀逐个剪碎，非常费时、费工的问题，而提供了一种植物叶片DNA高通量快速提取磨样器。

技术方案

一种植物叶片DNA高通量快速提取磨样器的应用，其特征在于，所述磨样器由一个基座和手柄、若干个磨样头和连接杆构成，磨样器基座为长方体，磨样器基座为热绝缘材料，是用来固定连接杆和手柄的装置，基座上部与手柄连接，基部下部与连接杆相连，连接杆下部与磨样头连接。

所述磨样器各部件的连接方式有两种：一种是磨样头、连接杆、基座和手柄是分别加工的独立部件，磨样器由磨样头、连接杆、基座和手柄依次通过螺栓连接成；另一种是利用注射模具浇注系统直接浇注成型的整体部件，磨样器由磨样头、连接杆、基座和手柄依次自然浇注连接形成。

所述磨样头是破碎植物叶片的部件，形状为圆锥型、圆台型、球型、球缺型、椭球型、扁球型、高球型或圆柱型；连接杆为圆柱体，是用来连接磨样头和基座的部件。

所述磨样头直径为0.2cm～0.28cm；连接杆直径为0.1cm～0.52cm；连接杆和磨样头露出基座部分总长度为2cm～10cm。

所述磨样头共96个，通过96根连接杆与基座基部连接；其排列方式为8行，12列，相邻两根连接杆横向间距为0.37cm～0.9cm，相邻两根连接杆纵向间距为0.37cm～0.9cm，与200μL的96孔PCR板及96孔PCR仪完全匹配。

磨样器手柄为手持部分。

有益效果

本发明提供的植物叶片DNA高通量快速提取磨样器的应用可以一步完成96孔PCR板上所有样品破碎，达到DNA快速提取或直接PCR实验要求，极大节约的磨样时间和人力需求。同时，磨样器对叶片的破碎效果要好于剪刀裁剪，能得到更碎的样品，因而更有利于DNA提取，能得到更高浓度的DNA。

四、附图说明

图1本发明所诉的一种植物叶片DNA高通量快速提取磨样器侧视结构示意图

1磨样头；2连接杆；3基座；4手柄。

图2本发明所诉的一种植物叶片DNA高通量快速提取磨样器俯视结构示意图

1磨样头；2连接杆；3基座；A-H：横向8排磨样头及其连接杆；I-XII：纵向12列磨样头及其连接杆

图3本发明所述的磨样器破碎水稻叶片样品PCR检测结果。

L1-L96：是聚丙烯酰胺凝胶96个泳道，分别是96个不同的水稻叶片样品用本发明所述的磨样器破碎，然后用RM1370引物PCR扩增后聚丙烯酰胺凝胶检测结果。

五、具体实施方式