[发明专利]一种桑叶粗多糖的纯化方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及桑叶应用技术领域，具体地说，是一种桑叶粗多糖的纯化方法。

【背景技术】

桑叶为桑科桑属植物桑树叶。历代中医药书中都有桑叶能够治疗消渴的记载。如《本草经疏》载，桑叶味苦，甘，寒，甘所以益血，寒所以凉血，甘寒相合，故下气而益阴，又能明目而止渴；《本草纲目》载，桑叶乃手足阳明之药，煎汁代茶，能止消渴。近年来国内外很多研究结果表明桑叶具有很好的降血糖功能，在临床常用桑叶或桑叶为主的处方治疗糖尿病，并取得满意效果。现代药理研究证明桑叶具有抑制血糖上升，可防治和治疗糖尿病。其中多糖类化合物为主要有效成分之一。我国每年桑叶产量达万吨，除了用于养蚕之外，约有万吨因过剩而浪费。为了开发桑叶资源和开发生产天然降血糖保健品、药品，利用现代分离纯化技术得到高纯度的桑叶多糖产品具有重要的意义。

现有报道多集中在桑叶多糖的提取工艺研究上，而对桑叶多糖的纯化以及制备高纯度的产品方面研究相对甚少。

【发明内容】

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种桑叶粗多糖的纯化方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种桑叶粗多糖的纯化方法，其具体步骤为：

(1)将桑叶粗多糖制品用水溶解，至粗制品的终浓度为20-30mg/ml，过离子交换柱，先用水洗脱，然后用盐溶液洗脱；

离子交换柱的交换介质为DEAE-纤维素、DEAE-Sepharose等；

盐溶液为0.3～0.5mol/LNaCl溶液；

(2)将步骤(1)的盐洗脱液超滤，至浓缩液中多糖质量浓度为15-20％，超滤膜截留分子量为5000，浓缩液中加入体积浓度为95～100％的乙醇水溶液至乙醇体积分数为70～80％，搅拌、静置12～18h后，离心，收集沉淀物。

超滤膜截留分子量为5000；

离心的转速为5000～8000rpm；(3)取步骤(2)所得的沉淀物，先以无水乙醇洗涤后经减压低温干燥、粉碎，得到桑叶多糖精制产品。

低温干燥条件为在40～60℃，真空度为-0.1MPa～-0.085Mpa，干燥时间12～18h。

与现有技术相比，本发明的积极效果是：

本发明公开一种桑叶粗多糖的纯化方法，其步骤主要为桑叶多糖粗制品溶解后过离子交换柱，采用一定浓度的盐溶液洗脱，洗脱液再通过超滤浓缩醇沉干燥后即得到高纯度桑叶多糖，产品中多糖含量在60％以上。

【具体实施方式】

以下提供本发明一种桑叶粗多糖的纯化方法的具体实施方式。

实施例1

DEAE-纤维素层析柱(5.0cm×50cm)先用蒸馏水平衡，10g桑叶粗多糖用水溶解后，上样。先用水洗脱，然后用0.3mol/LNaCl溶液洗脱。洗脱流速为3mL/min。将盐洗脱液进行超滤浓缩，滤膜截留分子量5000，得到多糖含量为15％的浓缩液100ml。向多糖浓缩液中加入95％的乙醇400ml，充分搅拌，降低溶液温度至4℃，静置后，离心，取沉淀物。利用无水乙醇洗涤沉淀物，沉淀物减压低温干燥(-0.085Mpa，60℃)后，粉碎至60目，得到浅黄色粉末1.8g，经苯酚-硫酸法测定该产品桑叶多糖含量达71％。

实施例2

DEAE-纤维素层析柱(5.0cm×50cm)先用蒸馏水平衡，10g桑叶粗多糖用水溶解后，上样。先用水洗脱，然后用0.4mol/LNaCl溶液洗脱。洗脱流速为3mL/min。将盐洗脱液进行超滤浓缩，滤膜截留分子量5000，得到多糖含量为12％的浓缩液120ml。向多糖浓缩液中加入95％的乙醇400ml，充分搅拌，降低溶液温度至4℃，静置后，离心，取沉淀物。利用无水乙醇洗涤沉淀物，沉淀物减压低温干燥(-0.085Mpa，60℃)后，粉碎至60目，得到浅黄色粉末1.8g，经苯酚-硫酸法测定该产品桑叶多糖含量达71％。

实施例3

DEAE-纤维素层析柱(5.0cm×50cm)先用蒸馏水平衡，10g桑叶粗多糖用水溶解后，上样。先用水洗脱，然后用0.4mol/LNaCl溶液洗脱。洗脱流速为3mL/min。将盐洗脱液进行超滤浓缩，滤膜截留分子量5000，得到多糖含量为15％的浓缩液100ml。向多糖浓缩液中加入95％的乙醇380ml，充分搅拌，降低溶液温度至4℃，静置后，离心，取沉淀物。利用无水乙醇洗涤沉淀物，沉淀物减压低温干燥(-0.085Mpa，60℃)后，粉碎至60目，得到浅黄色粉末1.8g，经苯酚-硫酸法测定该产品桑叶多糖含量达73％。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围内。