[发明专利]同时鉴别禽流感主要流行亚型的GeXP快速检测引物组、试剂盒及其应用有效
申请号: | 201510845245.9 | 申请日: | 2015-11-27 |
公开(公告)号: | CN105349698B | 公开(公告)日: | 2020-01-14 |
发明(设计)人: | 谢芝勋;李孟;谢志勤;罗思思;谢丽基;黄莉;邓显文;黄娇玲;范晴;张艳芳;曾婷婷;王盛 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 11279 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 | 代理人: | 王正茂 |
地址: | 530001 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同时 鉴别 禽流感 主要 流行 gexp 快速 检测 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种同时鉴别禽流感主要流行亚型的GeXP快速检测引物组,其特征在于:包括7对特异性引物和1对通用引物;7对特异性引物分别是引物对A1和A2、引物对B1和B2、引物对C1和C2、引物对D1和D2、引物对E1和E1、引物对F1和F2、引物对G1和G2;1对通用引物为Cy5-Tag-F和Tag-R;其分别为SEQ ID No.1至SEQ ID No.16所示的序列。
2.一种同时鉴别禽流感主要流行亚型的GeXP快速检测试剂盒,包括cDNA、10×PCRbuffer、MgCl2、dNTP、Jumpstart Taq polymerase、7对特异性引物、1对通用引物和RNA-free水,其特征在于:所述的7对特异性引物、1对通用引物分别为SEQ ID No.1至SEQ IDNo.16所示的序列。
3.根据权利要求2所述的同时鉴别禽流感主要流行亚型的GeXP快速检测试剂盒,其特征在于:所述的7对特异性引物引物对A1和A2、引物对B1和B2、引物对C1和C2、引物对D1和D2、引物对E1和E2、引物对F1和F2、引物对G1和G2在PCR反应体系中对应的摩尔浓度分别为150nmol/L、100nmol/L、150nmol/L、100nmol/L、150nmol/L、200nmol/L、150nmol/L;所述的通用引物Cy5-Tag-F、Tag-R在PCR反应体系中的摩尔浓度为500nmol/L。
4.根据权利要求3所述的同时鉴别禽流感主要流行亚型的GeXP快速检测试剂盒,其特征在于:所述的试剂盒的总体积为25μL/管,其中包含:cDNA 2.0μL,10×PCR buffer 2.5μL,MgCl2 2.5μL,dNTP 1μL,Jumpstart Taq polymerase 1.2μL,7对特异性引物混合物1.25μL,上、下游通用引物混合物1.25μL,RNA-free水补足至25μL。
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