[发明专利]一种细胞培养液及其在培养巨核祖细胞中的应用有效
| 申请号： | 201510848685.X | 申请日： | 2015-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN105296420B | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;万桦 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 培养液 及其 培养 巨核祖 中的 应用 | ||
1.一种细胞培养液，其特征在于，由IMEM培养基、WNT3a蛋白、胰岛素、Flt-3L、白蛋白、非必需氨基酸、血小板生成素、干细胞生长因子、白介素3和白介素6组成；
所述WNT3a蛋白、胰岛素、Flt-3L、白蛋白、非必需氨基酸、血小板生成素、干细胞生长因子、 白介素3和白介素6的质量比为(15～35)：(15×103～35×103)：(30～45)：(50×103～100×103)：(50×103～80×103)：(30～50)：(25～40)：(20～40)：(30～50)。
2.根据权利要求1所述的细胞培养液，其特征在于，其中各组分的浓度分别为：
3.权利要求1～2任一项所述的细胞培养液在巨核祖细胞培养中的应用。
4.一种巨核祖细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：以权利要求1～2任一项所述的细胞培养液培养白膜层细胞，1.5h～2.5h后吸取悬浮细胞；
步骤2：将所述悬浮细胞以权利要求1～2任一项所述的细胞培养液培养，获得巨核祖细胞。
5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述白膜层细胞的制备方法为：将脐血以Ficoll分离液分离，制得白膜层细胞。
6.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述白膜层细胞的接种密度为1×105cell/ml。
7.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，步骤2中所述培养的条件为，每3天，半量换液，保持细胞密度为1×105cell/mL。
8.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，步骤2所述培养的时间为14d～20d。
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