[发明专利]部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针及其制备方法

权利要求书

1.一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针，其特征是片层厚度为1.1 nm，2?(001)为10.86°~11.10°，2?(002)为22.10°~22.66°，C/O比值为0.49~0.53，碳碳键 比例为34.22%~52.46%，能猝灭荧光分子修饰单链DNA的荧光。

2.根据权利要求1所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针，其特 征是荧光猝灭效应随着碳碳键比例的增加而增强。

3.根据权利要求1所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针，其特 征是15μL浓度为100μg/mL的部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针，加入40μ L浓度为500nmol/L的6-羧基荧光素修饰ssDNA和445μL10mmol/L、pH8.0的含50mmol/ LNaCl和1mmol/LEDTA的Tris-HCl缓冲液，室温反应30秒，荧光猝灭率为44.5~99.3%。

4.一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针的制备方法，其特征是将氧化 石墨烯水溶液与NaOH水溶液等体积混合，室温反应后，离心水洗，沉淀恒温干燥，得到部分 还原氧化石墨烯固体，将部分还原氧化石墨烯固体加水超声剥离得稳定的部分还原氧化石 墨烯水溶液。

5.根据权利要求4所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针的制备 方法，其特征是所使用的氧化石墨烯制备方法为：将鳞片石墨加入到浓硫酸和磷酸的混合 溶液中，充分搅拌后，置于在0℃冰浴中，将高锰酸钾少量多次，缓慢加入到以上混合溶液 中，保持0℃冰浴，磁力搅拌后，将所得墨绿混悬液转移到温水浴中获得墨绿混悬液，然后 将所得墨绿混悬液转移至温水浴中，反应获得紫黑色混悬液，将冰水缓慢加入到得到的紫 黑色混悬液中，剧烈搅拌获得溶液，继而往溶液中逐滴滴加过氧化氢溶液，溶液颜色突变为 亮黄色，搅拌后所得溶液经孔径20-30微米的G1砂芯漏斗过滤，继而离心分离，弃去上清液； 沉淀物中加入双蒸水充分振荡洗涤，离心分离，弃去上清液，沉淀颜色呈土黄色；再加入盐 酸充分振荡洗涤，经孔径20-30微米的G1砂芯漏斗过滤去除不溶颗粒，滤液离心分离，弃去 上清液，沉淀颜色继续加深；接着用无水乙醇将沉淀物洗至pH值为中性，离心分离，弃去上 清液，沉淀呈棕黄色；最后用乙醚冲洗沉淀，经孔径1.5-2.5微米的G5砂芯漏斗过滤，滤饼在 室温下过夜晾干，得到棕色的氧化石墨烯。

6.根据权利要求4所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针的制备 方法，其特征是NaOH水溶液的浓度为20mmol/L~10mmol/L。

7.根据权利要求4所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针的制备 方法，其特征是反应时间为0.5~2小时。

8.根据权利要求4所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针的制备 方法，其特征是恒温干燥温度为50~60℃，干燥时间为6~12小时。

9.根据权利要求5所述的一种部分还原氧化石墨烯荧光共振能量转移纳米探针的制备 方法，其特征是所使用的氧化石墨烯制备方法为：称取325目鳞片石墨2.7g，加入到316mL 浓度为18.4mol/L的浓硫酸和36mL浓度为14.7mol/L的磷酸的混合溶液中，充分搅拌后， 置于在0℃冰浴中，将16.2g高锰酸钾少量多次，缓慢加入到以上混合溶液中，保持0℃冰 浴，磁力搅拌3小时后，将所得墨绿混悬液转移至35℃温水浴中，控温1小时，然后将所得墨 绿混悬液转移至50℃温水浴中，控温12小时，360mL冰水缓慢加入到得到的紫黑色混悬液 混合物中，剧烈搅拌1小时，继而往溶液中逐滴滴加12mL30wt%过氧化氢溶液，溶液颜色 突变为亮黄色，搅拌30分钟，所得溶液经孔径20-30微米的G1砂芯漏斗过滤，继而4000转 每分钟离心30分钟，弃去上清液；加入180mL双蒸水充分振荡洗涤，4000转每分钟离心30 分钟，弃去上清液，沉淀颜色呈土黄色；再加入180mL30wt%盐酸充分振荡洗涤，经孔径20- 30微米的G1砂芯漏斗过滤去除不溶颗粒，滤液4000转每分钟离心30分钟，弃去上清液，沉 淀颜色继续加深；接着多次用无水乙醇将沉淀物洗至pH值为中性，4000转每分钟离心30分 钟，弃去上清液，沉淀呈棕黄色；最后用乙醚冲洗沉淀，经孔径1.5-2.5微米的G5砂芯漏斗过 滤，滤饼在室温下过夜晾干，得到棕色的氧化石墨烯。