[发明专利]一种稳定性强的单试剂液态血氨（AMM）检测试剂

说明书

本发明涉及一种血氨（AMM）检测技术领域，特别涉及一种稳定性强的单试剂的液态血氨（AMM）检测试剂。试剂的主要组成成分有缓冲液、LDH、重金属离子螯合剂、离子平衡剂、防腐剂、α‑KG、NADH.NA2、表面活性剂和保护剂等主要物质，本试剂建立的是谷氨酸脱氢酶两点法动力学法的单试剂，有效的简化了使用的操作，且保证了产品有效成分的稳定性，恰当的金属螯合剂的选择有效的去除了重金属离子对试剂中酶的活性的抑制，并且自身不会对酶类产生干扰，适当的保护剂的加入有效测保护了试剂中酶类的稳定性和关键底物的稳定性，这些物质的加入有效的保证了所发明的单试剂产品的稳定性，大大方便了临床中的使用和推广。

技术领域

本发明涉及一种血氨（AMM）检测技术领域，特别涉及一种稳定性强的单试剂的液态血氨（AMM）检测试剂。

背景技术

体内各组织各种氨基酸分解代谢产生的氨以及由肠管吸收进来的氨进入血液，形成血氨。血氨正常值18-72μmol/L。血氨的产生分为内源性产生和外源性获取，内源性产生主要是体内代谢产生的氨称为内源性氨，主要来自氨基酸的脱氨基作用，部分来自肾小管上皮细胞中谷氨酰胺分解产生的氨。胺类的分解也可产生氨。外源性获取则由消化道吸收人体内的氨称为外源性氨。它包括肠道内未被消化的蛋白质和未被吸收的氨基酸，经肠道细菌作用产生的氨。血中尿素扩散到肠道，经细菌尿素酶作用水解生成的氨。

血氨增高是肝性脑病临床特征之一，他的检测结果的准确性对于肝性脑病、儿科Reye综合征等的准确诊断有非常重要的意义。血氨在人体中主要以NH4+和NH3两种形式存在，血液中血氨的主要来源主要是肠道产生的氨和肾脏分泌的氨。医学中检测血液中氨的方法非常多，比如去蛋白波氏比色法、氨电极法、扩散法、离子交换层析法、酶法和干化学法等方法。其中扩散法和波氏比色法灵敏度较低，准确性和精密度满足不了临床的要求，离子交换层析法则需要非常长的时间的处理，氨电极法准确性和精密度非常好，但是检测结果的稳定性受到多种因素的影响，并且电极需要经常的保养和更换，检测的成本和操作要求较高，无法在普通医院中普及。目前使用的较多的为干化学法和酶法，这两种方法可以直接应用在半自动和全自动生化分析仪器上，成本较低，操作相对较低，但是干化学法需要将干粉在使用前进行手工处理，这无疑增加了操作的繁琐性，也增加操作的误差，并且干粉一旦被溶解后保存时间较短，试剂中关键组分容易衰减，无法保证检测结果的稳定性和准确性，而液体的酶两点动力学法则不需要做前期的工作，直接可以配合仪器使用，但是目前市场出现的酶两点法试剂为了保证试剂的稳定性，多为四试剂或者为三试剂，因此客户在使用的时候必须将试剂按照比例调配混匀，试剂一旦在混合之后多不稳定，也必须要尽快使用，不然的话试剂会发生衰减，影响结果的准确性，因此发明一种准确性强又稳定的酶两点法单试剂，能够大大简化操作的流程，方便临床的应用，有很大的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种稳定性强的单试剂的液态血氨（AMM）检测试剂以及检测方法。

基本原理：

谷氨酸脱氢酶两点法检测血氨的基本原理为：在乳酸脱氢酶（LDH）的作用下，血清中干扰氨测定的丙酮酸在预反应中被除去。氨在谷氨酸脱氢酶的作用下与α-KG 和 NADH反应，与同样处理的校准液比较，可计算出血清中氨的含量。

第一步：乳酸脱氢酶

丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸+NAD+

第二步：GLDH

α-酮戊二酸+氨+NADH 谷氨酸+NAD+ +H2O。

本发明是通过以下步骤得到的：

一种稳定性强的单试剂液态血氨试剂试剂组成如下：

缓冲液_{·······································}50mmol/L，