[发明专利]CSF2基因及其表达产物的新用途

说明书

本发明涉及CSF2基因及其表达产物的新用途，更具体的涉及CSF2基因及其表达产物在诊治颅内动脉瘤中的应用。发明人基于高通量测序分析，挑选出候选基因CSF2，并进行了RT‑PCR验证和细胞验证，结果显示CSF2mRNA在颅内动脉瘤组中高表达，干扰CSF2基因表达会影响EPCs的活性。本发明提供了一种颅内动脉瘤的潜在诊疗新靶点，具有重要的临床应用价值。

技术领域

本发明涉及肿瘤标志物，具体涉及CSF2基因及其表达产物的新用途，更具体的涉及CSF2基因及其表达产物在诊治颅内动脉瘤中的应用。

背景技术

颅内动脉瘤(intracranial aneurysm，IA)是动脉管壁病理性局限性扩张产生的脑血管瘤样突起，其破裂是引起人类自发性蛛网膜下腔出血的首位原因(约占79％-89％)，占颅内出血的25％，其病死率及致残率极高，严重影响着人们的健康和生命。随着影像技术的发展和人们健康认识水平的提高，未破裂动脉瘤的发现率也有所增加，颅内动脉瘤己经是常见和多发的脑血管病之一。通过百余年的研究与实践，对颅内动脉瘤的发生、生长、塑形、破裂的确切机制仍不明了。通常认为IA的形成、发展和破裂是由遗传、吸烟、年龄、环境、动脉粥样硬化、高血压和高血脂以及血流动力学改变等多重因素造成的。随着对其研究的不断深入，人们己经逐渐认识到IA通常多发生在willis动脉环以及颅内动脉血管分叉处或血管弯曲部位，血液流经此处时形成冲击流等复杂流型使血管内皮细胞及其连接受损，炎症细胞和炎性物质等更易进入内皮下，引起的血管壁炎症和血管壁重构失调，研究显示持续的血流动力学变化会导致血管的病理重构，包括内弹力层的降解、平滑肌细胞和内皮细胞的缺失、细胞增殖减少等。IA的形成可能是颅内相关动脉内皮组织损伤与修复失衡的结果，但具体哪些基因参与其中仍有待研究揭示。

发明人基于高通量测序对5例颅内动脉瘤壁组织和3例进行分析，在差异表达基因中挑选出显著高表达的候选基因CSF2，现有研究表明CSF2调控粒细胞和巨噬细胞的增殖和分化，但并没有研究揭示其与颅内动脉瘤的关系，发明人进行了RT-PCR验证和细胞验证，证实了CSF2在颅内动脉瘤组中高表达，干扰CSF2基因的表达会影响EPCs的活性。本发明提供了一种颅内动脉瘤的诊治靶点，具有重要的临床应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种颅内动脉瘤诊断制剂，所述颅内动脉瘤诊断制剂检测CSF2基因和/或CSF2基因表达产物的表达量。

进一步，所述颅内动脉瘤诊断制剂采用荧光定量PCR试剂盒、基因芯片、免疫方法检测颅内动脉瘤组织中CSF2基因的表达，优选的，所述的荧光定量PCR试剂盒中含有一对特异性扩增CSF2基因的引物；所述的基因芯片中包括与CSF2基因的核酸序列杂交的探针，更优选的，荧光定量PCR试剂盒内含有特异性检测CSF2基因的上游引物和下游引物，上游引物序列为SEQ ID NO.10，下游引物序列为SEQ ID NO.11。

进一步，检测外周血和/或组织中CSF2基因和/或基因的表达产物。

进一步，所述的颅内动脉瘤的诊断制剂采用免疫方法检测颅内动脉瘤外周血和/或组织中CSF2基因的表达产物，优选的，所述免疫方法为ELISA检测和/或胶体金检测。

进一步，所述检测CSF2表达产物的ELISA法为使用ELISA检测试剂盒。所述试剂盒中的抗体可采用市售的CSF2单克隆抗体。进一步，所述的试剂盒包括：包被CSF2单克隆抗体的固相载体，酶标抗体，酶的底物，蛋白标准品，阴性对照品，稀释液，洗涤液，酶反应终止液等。

进一步，所述检测CSF2蛋白的胶体金法为使用检测试剂盒，所述的抗体可采用市售的CSF2单克隆抗体。进一步，所述的胶体金检测试剂盒采用胶体金免疫层析技术或胶体金渗滤法。进一步，所述的胶体金检测试剂盒硝酸纤维素膜上的检测区(T)喷点有抗CSF2单克隆抗体、质控区(C)喷点有免疫球蛋白IgG。

本发明的目的在于提供上述颅内动脉瘤诊断制剂在制备颅内动脉瘤诊断工具中的应用。