[发明专利]一种羰基还原酶AcCR及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种羰基还原酶AcCR，其特征在于：其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

2.编码权利要求1所述的羰基还原酶AcCR的基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。

3.权利要求1所述的羰基还原酶AcCR在制备手性醇及其衍生物中的应用。

4.一种含有羰基还原酶AcCR基因的重组载体，其特征在于：是通过将GST标签、权利要求2中所述的核苷酸序列与载体连接得到的。

5.一种含有羰基还原酶AcCR基因和葡萄糖脱氢酶GDH基因的重组载体，其特征在于：是通过将GST标签、权利要求2中所述的核苷酸序列和编码葡萄糖脱氢酶GDH的基因的核苷酸序列与载体连接得到的。

6.根据权利要求5所述的含有羰基还原酶AcCR基因和葡萄糖脱氢酶GDH基因的重组载体，其特征在于：

所述的载体为pETDuet-1。

7.权利要求5或6所述的含有羰基还原酶AcCR基因和葡萄糖脱氢酶GDH基因的重组载体的制备方法，包含如下步骤：

(1)以醋酸杆菌菌株XZY003的基因组DNA为模板，根据权利要求2所述的核苷酸序列设计引物，PCR扩增得到羰基还原酶AcCR基因；将扩增产物与载体pGEX-2T连接，得到重组载体pGEX-accr；

(2)以重组载体pGEX-accr为模板，设计引物，PCR扩增得到带有GST标签的羰基还原酶AcCR基因，并将其连接到共表达载体pETDuet-1上，得到重组表达载体pETDuet-gaccr；

(3)以枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis168的基因组DNA为模板，设计引物，PCR扩增得到葡萄糖脱氢酶GDH基因，并将其连接到步骤(2)制得的重组质粒载体pETDuet-gaccr上，得到含有羰基还原酶AcCR基因和葡萄糖脱氢酶GDH基因的重组载体。

8.一种羰基还原酶AcCR与葡萄糖脱氢酶GDH共表达的重组基因工程菌，其特征在于：是将权利要求5或6所述的含有羰基还原酶AcCR基因和葡萄糖脱氢酶GDH基因的重组载体转化到原核表达系统或真核表达系统中得到。

9.根据权利要求7所述的羰基还原酶AcCR与葡萄糖脱氢酶GDH共表达的重组基因工程菌，其特征在于：

所述的原核表达系统为大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS。

10.权利要求8或9所述的羰基还原酶AcCR与葡萄糖脱氢酶GDH共表达的重组基因工程菌在催化不对称还原潜手性羰基化合物制备手性醇及其衍生物中的应用。