[发明专利]一种含有鲫鱼IFN干扰素的蓝藻工程菌及应用

说明书

本发明公开了一种含有鲫鱼IFN干扰素的蓝藻工程菌及应用，通过将鲫鱼IFN基因转入蓝藻，获了一种可表达鲫鱼干扰素的转基因蓝藻。将该转基因蓝藻作为饲料添加剂加入鱼饲料中，减少了干扰素在投喂过程中以及消化道中的损耗，实现了使用投喂的方式即能达到提高免疫保护效果的目的，同时这种方法比注射免疫更为便利，适用于鱼类养殖业。因此，将转基因蓝藻作为饲料添加剂添加到鱼饲料中，通过其中的干扰素来提高动物体的免疫机能，从而提高其抗病能力，为开发安全的免疫增强型饲料提供一种解决方案。

技术领域

发明属于生物技术领域，具体涉及一种含有鲫鱼IFN干扰素的蓝藻工程菌及应用。

背景技术

随着水产养殖业的快速发展,养殖期间病害亦越来越严重。大量、盲目使用抗生素和化学合成药物不但防治效果差,而且还造成一系列不良后果。因此，国内外一些学者从免疫学角度开展水产养殖病害防治研究，通过给水产动物服用免疫添加剂来提高动物体的特异性和非特异性免疫机能，从而提高其抗病能力(朱小明，2005)。干扰素系统是机体对抗病毒感染的一道重要防御系统，它与细胞免疫、体液免疫及其他非特异性免疫协同作用抵抗病毒的侵染。在干扰素系统中产生的干扰素是一种广谱抗病毒剂，其作用是通过对细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，抑制病毒在宿主细胞中的复制。还可增强自然杀伤细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，增强抗病毒能力，在一定程度上还影响细胞生长和分化等多种生物活性。鱼类干扰素同样具有广谱的抗病毒功能，研究表明其能够诱导大量抗病毒基因的表达，包括其本身，形成一个正反馈作用，从而保护机体避免病毒感染致死。

重组干扰素作为一种蛋白质多肽类药物成功应用于人类和一些动物病毒病的防治。鱼类养殖业使用重组干扰素防治疾病发生的方法思路有三种，即注射、浸浴和口服。这些方法的初步应用研究表明所用防治方法不同，疗效差异较大：仅注射免疫方式使鱼获得一定的免疫保护，而拌料投喂(口服)和浸浴两种免疫方式未显示出免疫保护效果。然而，在养殖实践中注射免疫过于耗时耗力，如何减少重组干扰素在消化道吸收过程中的损耗，使更为便利和实用的投喂方式也同样发挥作用？这是对于养殖鱼类病毒病防治具有实用价值的问题。

蓝藻，作为高档水产养殖动物的饲料或饲料添加剂早已被广泛应用。蓝藻Synechococc us sp.PCC 7002作为一种能够光合自养的微生物，其低廉的培养成本，高效的生长速率以及特殊的细胞结构，为其作为产生干扰素CaIFN的工程菌提供了很大潜力。此外蓝藻Syne chococcus sp.PCC 7002的全基因组测序与功能注释已经完成，分子和遗传学操作十分方便；使得在蓝藻Synechococcus sp.PCC 7002中表达外源的干扰素CaIFN基因成为可能。本发明使用转基因蓝藻作为饲料添加剂加入鱼饲料中，减少了干扰素在投喂过程中以及消化道中的损耗，实现了使用投喂的方式即能达到提高免疫保护效果的目的，同时这种方法比注射免疫更为便利，适用于鱼类养殖业。因此，将转基因蓝藻作为饲料添加剂添加到鱼饲料中，通过其中的干扰素来提高动物体的免疫机能，从而提高其抗病能力，为开发安全的免疫增强型饲料提供一种解决方案。

发明内容

本发明的目的在于提供含有鲫鱼IFN干扰素的蓝藻工程菌，通过转基因技术将鲫IFN(C aIFN)基因克隆至蓝藻中，即可得到一种分泌干扰素的蓝藻工程菌。

本发明的另一个目的在于提供含有鲫鱼IFN干扰素的蓝藻工程菌的应用。该基因工程菌可作为鱼饲料的添加剂，通过其中的干扰素来提高动物体的免疫机能，从而提高其抗病能力。

本发明还有一个目的在于提供了一种含有鲫鱼IFN干扰素的蓝藻工程菌的鱼饲料，饲料配方合理，该种饲料配方含有鱼类生长所需的各类营养及元素，满足鱼类的生长所需，同时加入了含有干扰素CaIFN的蓝藻，这些原料充分混匀后经饲料机做成大小合适的饲料颗粒，方便投喂，减小干扰素在投喂过程中的消耗，也保护干扰素有效进入鱼体发挥免疫保护效果。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术措施：