[发明专利]一种适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片保存液及其保存方法和应用在审
申请号: | 201510866618.0 | 申请日: | 2015-12-01 |
公开(公告)号: | CN105248414A | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 黄春琼;刘国道;白昌军 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 |
主分类号: | A01N3/00 | 分类号: | A01N3/00;C12N15/10 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫;陈欢 |
地址: | 57173*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 提取 禾本科 植物 基因组 dna 新鲜 叶片 保存 及其 方法 应用 | ||
1.一种适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片保存液,其特征在于,所述保存液包括:
余量为水。
2.一种如权利要求1所述的适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片保存液,其特征在于,所述禾本科植物为狗牙根、结缕草或水稻。
3.一种禾本科植物新鲜叶片的保存及基因组DNA的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)配制含有如下成分的保存液:
余量为水;
按照所述保存液中各成分的比例将十二烷基硫酸钠、乙醇、氯仿、醋酸钠、乙二胺四乙酸、氯化钠用超纯水溶解和混合后,调节pH=8.0,定容,然后置于灭菌瓶中在121℃、0.1Mpa灭菌20min;
(2)灭菌后,加入2%的聚乙烯吡咯烷酮,得到混合液,备用;
(3)将禾本科植物新鲜叶片切割为截面不大于0.5cm2的条块;
(4)使用前,向(2)中的混合液中加入β-巯基乙醇至终浓度为2%,制得保存液;
(5)将所述禾本科植物新鲜叶片条块浸没在(4)中的保存液中,常温保存;
(6)取步骤(5)保存有禾本科植物新鲜叶片条块的保存液在65℃下加热3-5min,再采用常规SDS法提取基因组DNA。
4.如权利要求3所述的禾本科植物新鲜叶片的保存及基因组DNA的提取方法,其特征在于,所述禾本科植物为狗牙根、结缕草或水稻。
5.如权利要求1所述的适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片保存液或如权利要求3所述的适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片的保存方法在禾本科植物新鲜叶片保存中的应用。
6.如权利要求1所述的适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片保存液或如权利要求3所述的适用于提取禾本科植物基因组DNA的新鲜叶片的保存方法在提取禾本科植物基因组DNA的应用。
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